科研产出
改良Trizol法提取富含花青素马铃薯块茎的总RNA
《山东农业科学 》 2018
摘要：富含花青素的马铃薯块茎因含有大量多糖和多酚类次级代谢产物而难以大量提取高质量的总RNA。本研究以紫色和红色马铃薯为材料,利用改良Trizol法实现了块茎总RNA的快速高质量提取。试验结果表明,在Trizol法中添加2%(V/V)"-巯基乙醇、0. 75%(W/V)十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)和7. 5%(W/V)醋酸钾(KOAc),可以有效去除多糖、多酚类物质,获得高产、完整的总RNA。改良Trizol法提取时间短、操作方便,提取的RNA通过了actin RT-PCR和18S rRNA RT-q PCR检验,可以用于后续的分子生物学试验。
关键词： 马铃薯 块茎 花青素 RNA提取 醋酸钾 改良Trizol法
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葱属主要蔬菜作物高质量RNA提取方法研究
《山东农业科学 》 2016
摘要：葱属蔬菜作物(洋葱、大葱、大蒜和韭菜等)各组织部位富含多糖等次生代谢物质,严重影响了RNA的提取质量。本研究以洋葱叶片为样本,对多种RNA提取方法进行了比较分析,获得了一套适合葱属蔬菜作物RNA提取的系统方法。该方法将CTAB-GT连用、蛋白酶K替代DEPC和冰浴电泳检测相结合,其所提取的RNA样本产量约为152.35μg/g FW,RNA完整性RIN值约为7.5,条带清晰,无多糖、蛋白质和DNA残留,28S约为18S两倍,提取过程安全无强致癌物质DEPC,可满足下游RNA分子实验的要求。且该方法适合于大葱、洋葱、大蒜和韭菜不同组织部位样本RNA的提取。
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拟南芥和烟草幼嫩种子RNA不同提取方法的比较
《中国农学通报 》 2009 北大核心
摘要：拟南芥和烟草在植物分子生物学研究中都占有非常重要的地位,为了后续试验的顺利进行,欲探索适合提取拟南芥及烟草幼嫩种子总RNA的经济快捷的方法。采用4种方法分别对拟南芥和烟草幼嫩种子的总RNA进行了提取和分析,3种方法所提取的总RNA均能满足一般的下游操作。Trizol法提取的RNA质量低。CTAB-异丙醇法提取的总RNA产量最高,并具有提取步骤少,操作时间短,价格便宜等优点,可用于大量样品提取;百泰克试剂盒提取时间短,可在常温下操作;CTAB-LiCl法提取的总RNA基本无基因组DNA的污染,但是不利于小分子RNA的沉淀。经紫外分光光度计检测,3种方法提取的总RNAOD260/OD280均在1.80~1.97,表明蛋白质及其他有机溶剂的污染很少,OD260/OD230在2.03~2.37,表明盐类小分子的污染也较少;电泳检测28S rRNA和18S rRNA条带清晰,28S rRNA的亮度基本为18SrRNA的2倍,所提取的总RNA质量较高。将CTAB-异丙醇法提取的拟南芥总RNA用于反转录,可获得高质量的cDNA,ds cDNA清晰的分布在100~3000 bp之间。
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花生种子总RNA提取的一种有效方法
《花生学报 》 2008
摘要：从植物中提取RNA的方法有多种,由于花生种子富含脂肪、蛋白质、多糖和酚类化合物,有些方法并不适于花生种子RNA的提取。本文设计了一种从花生种子中分离高质量总RNA的方法,并提取了花生的根、茎、叶、种子等不同器官的RNA。结果证明,利用该方法提取的花生种子总RNA质量较高,完全能满足后续的分子生物学研究。同样也适于花生根、茎、叶总RNA的提取。
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