科研产出
非洲猪瘟病毒A104R蛋白的原核表达及其多克隆抗体的制备与鉴定
《中国兽医杂志 》 2022 北大核心
摘要:为制备非洲猪瘟病毒(ASFV)重组蛋白A104R(rA104R)及研制抗rA104R的多克隆抗体,本研究通过ExPASy等在线生物信息学软件初步预测该蛋白的理化性质、信号肽、核定位信号等信息,继而合成ASFV的A104R基因,构建基于pET-28a(+)载体的原核表达系统.重组蛋白用Ni亲和层析纯化后,经聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、Western blotting和液相色谱-质谱联用(LC-MS)技术鉴定.纯化的蛋白免疫6-8周龄BALB/c小鼠,制备抗rA104R的多克隆抗体,通过West-ern blotting 和间接酶联免疫吸附试验(ELISA)鉴定其反应性和免疫原性.结果显示,原核表达载体构建成功;重组菌在37℃诱导8 h后表达量最高,在包涵体和上清中均有表达,表明其呈部分可溶性表达;纯化的重组蛋白大小约16 kDa,且反应性良好;LC-MS分析结果显示,该rA104R蛋白多个肽段均与目标蛋白的氨基酸序列相匹配,匹配率为59%;制备的鼠源抗rA104R多克隆抗体效价大于1∶2 048 000,具有良好的免疫原性.结果表明,本研究制备的rA104R及其多克隆抗体可进一步用于生物学功能研究,并可为疫苗及相关诊断试剂研制提供基础材料.
关键词: 非洲猪瘟病毒 原核表达 A104R重组蛋白 液相色谱-质谱
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HPLC-MS/MS法检测葡萄中嘧菌酯的残留量
《现代农药 》 2020
摘要:建立了高效液相色谱-串联质谱法检测葡萄中嘧菌酯的残留分析方法。样品经乙腈和水混合溶液提取,净化后高效液相色谱-串联质谱仪检测,外标法定量。结果表明,嘧菌酯在葡萄中平均添加回收率为98.8%~105.4%,变异系数为0.5%~1.0%。
关键词: HPLC-MS/MS 嘧菌酯 葡萄 残留
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LC-MS/MS法测定玉米植株和土壤中磺酰磺隆残留量
《现代农药 》 2019
摘要:建立了玉米植株和土壤中磺酰磺隆残留量的LC-MS/MS检测方法。以乙腈为提取剂,经Bond Elut Carbon固相萃取柱净化,通过Agilent 1260-6460 LC-MS/MS液质联用仪进行定量检测。结果表明,在5~200μg/L范围内,磺酰磺隆色谱丰度与进样质量浓度之间线性关系良好,其线性回归方程为y=2 746.8 x+2 519.8 (R~2=0.994 4),磺酰磺隆在玉米植株和土壤中的平均回收率为93.96%~96.92%,相对标准偏差为1.42%~3.60%,满足试验质量控制要求。该方法准确度、精密度和灵敏度较高,线性关系良好,具有简便、快速、准确及分离效果好的优点。
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基于QuEChERS法前处理的GC-MS检测梨中7种菊酯类农药残留
《农药 》 2019 北大核心 CSCD
摘要:[目的]建立一种同时测定梨中7种菊酯类农药的GC-MS方法.[方法]采用GC-MS法,QuEChERS法前处理梨样品,用乙腈溶液提取,PSA净化,对梨中7种菊酯类农药进行了多残留分析.[结果]7种菊酯类农药在0.01~ 1.0 mg/L线性范围内,均呈现良好的线性关系,相关系数R2>0.9952;在0.01、0.1、0.5 mg/kg 3个加标质量分数下,各农药的平均回收率均在73.4%~106.0%之间,相对标准偏差在2.9%~7.8%之间.[结论]所建立的方法可以提供准确的定性和定量分析,操作简单、快速、灵敏度高,符合农药多残留检测要求,且所测梨的农药残留符合国家标准.
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三七保健酸乳的制备和工艺优化
《食品工业 》 2016 北大核心
摘要:以超高温瞬时灭菌全脂牛乳和三七粉为主要原料,研究三七保健酸乳的制备工艺。在单因素基础上,通过正交试验确定最佳配方和最适发酵工艺参数,制成一种具有三七风味的保健酸乳,并对工艺优化后的三七保健酸乳进行了理化、微生物检验以及质构分析,并采用GS-MS分析了主要挥发性风味成分。结果表明三七保健酸乳最佳工艺条件为:三七添加量2%,蔗糖添加量7%,接种量为1.2 g/L,最佳前发酵温度为42℃,前发酵时间为7.5 h。最佳工艺条件制备的三七保健酸乳理化及微生物指标均符合国家标准。质构检测得出三七保健酸乳与对照酸乳(未加三七)在质构方面无显著差异。利用GS-MS检测出三七保健酸乳主要挥发性成分36种,其中13种挥发性成分与三七主要性挥发成分一致。
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不同酵母酒泥陈酿对贵人香葡萄酒质量的影响
《食品工业科技 》 2016 北大核心 CSCD
摘要:以3个不同酒泥陈酿时间、4种酵母发酵的贵人香葡萄酒为研究对象,通过对酒样理化指标和感官质量的分析,及采用顶空固相微萃取进行萃取,再用GC-MS内标半定量法对样品香气进行分析,研究酒泥陈酿对贵人香葡萄酒品质的影响。结果表明:经酒泥陈酿后12个酒样理化指标符合国标要求,干浸出物提高;经GC-MS分析得,酒泥陈酿后CY3079和EC1118的酯类总量增加,除CY3079外酮醛类和醇类总量均增加,有机酸类总量均提高;酒体质量明显得到提高,香气更为复杂、浓郁,酒体更加圆润,不同酵母酒泥陈酿适宜时间不同,酵母QA23、CY3079为1个月,酵母EC1118、X16为2~3个月。
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不同冷浸渍时间对贵人香葡萄酒品质影响的研究
《食品工业科技 》 2016 北大核心 CSCD
摘要:本实验与传统贵人香干白葡萄酒发酵工艺为对照CK(0 h),在5~8℃下,浸渍时间设定3个水平(1、6、11 h);发酵结束后各不同浸渍时间的酒样,储存时间设定3个水平(1、2、3个月)共获得9个处理。通过绘制发酵液折光糖变化的曲线和分析酒样理化指标、香气成分及感官品评,研究低温浸渍发酵对贵人香干白葡萄酒品质和香气的影响。结果表明:浸渍1 h酒样理化指标符合国家标准,香气新鲜浓郁,酒体饱满、平衡,后味干净,香气中酯类物质和醛类物质含量高且相对稳定。
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野生酵母和商品酵母发酵葡萄酒中挥发性成分差异研究
《食品工业科技 》 2016 北大核心 CSCD
摘要:采用顶空固相微萃取(HS-SPME)和气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术对5株商品酿酒酵母和7株野生酿酒酵母所酿葡萄酒中的挥发性物质进行分析。结果表明,各葡萄酒中挥发性物质的组成成分相差不大,但在含量上存在差异,野生酿酒酵母所酿造的葡萄酒中主要挥发性物质的总含量要高于商品酿酒酵母。对于葡萄酒中主要由酵母代谢产生的3类挥发性物质—酯类、醇类和酸类,其含量最高的均为用野生酿酒酵母酿造的葡萄酒,其中以W2和W7最为突出。感官分析结果表明,C1、C2和W2的果香、花香较为突出,C4和W2具有明显的草本味,C2和W1的胡椒味较强。
关键词: 酿酒酵母 葡萄酒 挥发性物质 HS-SPME GC-MS
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‘金凯特’杏果实发育期间香气成分分析
《山东农业科学 》 2016
摘要:采用顶空固相微萃取技术,对‘金凯特’杏绿熟期、商熟期和完熟期3个不同发育阶段的果实香气组分及含量进行了分析。结果表明,‘金凯特’杏的香气成分共46种,主要为酯类、醇类、烃类和醛类。果实不同发育阶段香气组分及其含量差异较大,其中绿熟期检出31种香气成分,商熟期检出32种,完熟期检出24种,都以酯类化合物含量最高,3个阶段酯类化合物百分含量分别为61.14%、70.02%和61.48%。乙酸己酯、己酸乙酯、2-甲基-丙酸己酯和1-己醇是金凯特杏的特征香气成分,完熟期其香气值分别为448.50、29.86、7.85和3.54。
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市售瘦肉精三联快速检测卡质量检测
《山东农业科学 》 2015
摘要:为评价和控制瘦肉精三联快速检测卡的质量,本试验配制系列标准添加浓度的猪尿样品,经UPLC-MS/MS方法确证后,对6个厂家生产的瘦肉精三联快速检测卡的检测限、准确率进行测定,并与仪器方法进行比较。结果表明:大多数厂家生产的瘦肉精三联快速检测卡不完全与其标示检测限相吻合;实际检测阈值高于标示检测限的情况较多;6个厂家生产的检测卡都存在一定的假阴性率(2%~14%)和假阳性率(2%~8%);与仪器方法进行比较发现两者的符合率介于75%~100%之间。总之,不同厂家生产的瘦肉精三联快速检测卡质量存在明显差异。
关键词: 瘦肉精 UPLC-MS/MS 三联快速检测卡
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