中国荷斯坦牛C4A基因5'侧翼区功能分析

杨岳; 袁海; 龙筱晔; 董宪君; 翟丽娜; 李永双; 王长法; 《畜牧与兽医 》 2015 北大核心

摘要：利用在线预测软件对牛C4A基因的5'侧翼区序列进行生物信息学分析,成功构建了一系列表达载体,利用双荧光素酶报告基因检测系统分析牛C4A基因的5'侧翼区启动活性。分别通过定点突变技术构建突变质粒,研究调控C4基本表达和诱导表达的转录因子结合位点。利用EMSA技术验证转录因子在研究细胞系中存在与否。结果显示,C4A基因启动子序列转录起始位点上游169 bp为报告基因荧光值最高的片段,即为启动子核心区;其中SP1(-169~-158)、E-box(-122~-117)和AP-1(-80~-71)是调控C4基本表达的主要转录因子结合位点,且3个转录因子在Hep G2细胞系中真实存在。

关键词： 中国荷斯坦牛 C4A基因 5'侧翼区