文献类型： 中文期刊

作者： 杨岳 ¹ ; 袁海 ¹ ; 龙筱晔 ¹ ; 董宪君 ¹ ; 翟丽娜 ¹ ; 李永双 ¹ ; 王长法 ² ;

作者机构： 1.国家知识产权局专利局专利审查协作江苏中心

2.山东省农业科学院奶牛研究中心

关键词： 中国荷斯坦牛;C4A基因;5'侧翼区

期刊名称： 畜牧与兽医

ISSN： 0529-5130

年卷期： 2015 年 47 卷 06 期

页码： 54-59

收录情况： 北大核心

摘要： 利用在线预测软件对牛C4A基因的5'侧翼区序列进行生物信息学分析,成功构建了一系列表达载体,利用双荧光素酶报告基因检测系统分析牛C4A基因的5'侧翼区启动活性。分别通过定点突变技术构建突变质粒,研究调控C4基本表达和诱导表达的转录因子结合位点。利用EMSA技术验证转录因子在研究细胞系中存在与否。结果显示,C4A基因启动子序列转录起始位点上游169 bp为报告基因荧光值最高的片段,即为启动子核心区;其中SP1(-169~-158)、E-box(-122~-117)和AP-1(-80~-71)是调控C4基本表达的主要转录因子结合位点,且3个转录因子在Hep G2细胞系中真实存在。