科研产出
PH826噬菌体与抗生素联用有效抑制多重耐药铜绿假单胞菌生物被膜的形成
《微生物学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：【目的】铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）是一种重要的革兰氏阴性病原体，可以加重囊性纤维化患者的肺部感染，最终会导致患者的死亡。然而由于多重耐药（multi-drug resistant,MDR）和泛耐药（pan-drug resistant, PDR）铜绿假单胞菌菌株的出现，使其防控变得更为严峻。【方法】从养殖场污水中分离能有效裂解多重耐药铜绿假单胞菌的噬菌体，研究其形态特征、生物学特性、宿主谱范围、基因组特征和体外抑菌能力等，并采用噬菌体和抗生素联用的方法进行生物被膜的抑制试验。【结果】透射电子显微镜的形态分析和基因组分析结合表明，该噬菌体属于Nankokuvirus病毒属。生物学特性试验表明，PH826具有广泛的温度稳定性（4-60℃）和pH稳定性（3.0-11.0）。宿主谱测试显示，PH826可以裂解13株铜绿假单胞菌（包括人源和动物源），体外抑菌试验显示，PH826在感染复数（multiplicity of infection, MOI）分别为10、1、0.1时对铜绿假单胞菌均有强烈的裂解作用。根据基因组分析，PH826噬菌体的基因组大小为87 956 bp,G+C含量为54.70%，编码165个开放阅读框（open reading frames, ORFs），并预测携带有裂解酶。值得注意的是，在24 h和48 h内，PH826和环丙沙星联用在1×、2×、4×最小抑菌浓度（minimum inhibitory concentration, MIC）的条件下都减少了80%以上的生物被膜的形成；PH826和美罗培南联用在24h和48h内，在2×MIC和4×MIC的条件下也减少了80%以上的生物被膜的形成。【结论】PH826可能是一种潜在的消毒剂和治疗剂，可以单独使用或与抗生素联合使用，用于预防和治疗致病性铜绿假单胞菌。
关键词： 噬菌体 铜绿假单胞菌 生物被膜 多重耐药性 抗生素
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噬菌体降低铜绿假单胞菌所致腐蛋的效果
《畜牧兽医学报 》 2020 北大核心 CSCD
摘要：铜绿假单胞菌是孵化过程中造成腐蛋的主要病原菌,拟尝试用裂解性噬菌体防治.选用腐蛋中筛选的铜绿假单胞菌PA-MH12,以此为宿主从河水中筛选到1株裂解性噬菌体MH12-Q,对其进行了生物学特性研究,体外进行了对铜绿假单胞菌所致腐蛋的防控效果试验.结果显示:噬菌体MH12-Q属于肌尾噬菌体科(Myoviri-dae),效价可达到1013 pfu·mL-1,完全裂解效价(CLC)为1010 pfu·mL-1,最适生长温度为37℃,pH稳定性好,最适pH为6~8,且其在pH4~10的效价都能维持在较高的水平.最佳感染复数(OMOI)为0.001,感染宿主的潜伏期为30 min,爆发期为70 min.噬菌体MH12-Q可使高浓度铜绿假单胞菌的感染率从70% 降低到40%.铜绿假单胞菌噬菌体M H12-Q的生物学性质适合生产应用,对孵化场腐蛋具有较好的防控作用,能够提高感染铜绿假单胞菌的鸡胚成活率.
关键词： 铜绿假单胞菌 腐蛋 裂解性噬菌体 生物学性质 防治
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铜绿假单胞菌的血清分型、鞭毛分型和脉冲场凝胶电泳分型
《中国兽医学报 》 2018 北大核心 CSCD
摘要：铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa,PA)是一种重要的人畜共患病原菌,给人畜健康带来威胁。细菌分型是揭示病原菌流行规律、传播机制以及制定相应防控措施的基础。选取水貂、人和羊源PA共78株分别进行O-抗原血清分型、H-抗原鞭毛分型以及脉冲场凝胶电泳(PFGE)分型。结果显示,60株水貂源PA主要流行血清型为G型(73.3%),其次为I,M,B,E型;鞭毛A型和B型分别占91.7%和8.3%。16株人源PA以血清型E型(25%)为主,其他型别G,M,I,B,D,F,H零散分布,鞭毛A,B型分别占68.8%和31.2%。2株羊源PA血清型为I型(100%),且均为鞭毛B型。PFGE分子分型共分为14个谱型,24个亚型,其中B1、F3、G1、H1这4个亚型的菌株同源性达到100%。结果表明,水貂源PA感染与血清G型和鞭毛A型高度相关(P<0.01);人源PA感染优势血清型为E型且与鞭毛A型显著相关(P<0.01);2株羊源PA感染均为血清I型和鞭毛B型;不同来源的PA菌株其PFGE分型呈现多样化和复杂性,相同来源的菌株其PFGE谱型有的完全相同,显示同一个克隆传播的可能,有的差异很大,显示不同分子克隆传播。本试验有助于阐明山东省3种来源PA的分子流行特征,为开展PA相关风险评估、控制及疾病诊治提供依据。
关键词： 铜绿假单胞菌 血清分型 鞭毛分型 脉冲场凝胶电泳分型
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铜绿假单胞菌对环丙沙星的抗药性和耐药性机制研究
《山东大学学报(医学版) 》 2011 北大核心
摘要：目的研究铜绿假单胞菌对环丙沙星的抗药性(resistance)和耐药性(tolerance)机制,并予以区分。方法分离养殖场和医院铜绿假单胞菌33株,用微量肉汤稀释法测定铜绿假单胞菌临床分离株对喹诺酮类抗生素的最低抑菌浓度(MIC),筛选喹诺酮抗药菌5株;体外连续培养诱导铜绿假单胞菌标准菌株P.aeruginosa ATCC27853,得到对环丙沙星和头孢噻肟的高抗药性菌株PA34。检测及分析铜绿假单胞菌喹诺酮耐药决定区(QRDR)的基因突变;荧光比色法检测不同抗药性表型的铜绿假单胞菌外排泵活性;荧光定量RT-PCR法检测铜绿假单胞菌外排泵、跨膜转运蛋白及喹诺酮靶酶编码基因的mRNA表达水平。结果 临床分离的5株喹诺酮抗药表型的铜绿假单胞菌,其外排泵活性均显著高于标准菌株(P<0.01),外排泵、喹诺酮靶位酶编码基因的mRNA的表达量上调、跨膜转运基因表达量下调,DNA旋转酶A亚基gyrA基因均发生点突变Thr-83→Ile。PA34和这5株抗药性菌株表现一致,但其MIC远高于这5株抗药性菌株,主要由于PA34除了gyrA基因发生点突变Thr-83→Ile外,parC基因发生多点突变Glu-84→Gln、Gln-91→Lys,且跨膜转运基因表达量极低。结论 在喹诺酮类抗生素选择压力下,铜绿假单胞菌能发展多种可能的机制以消除抗生素对细菌代谢的损伤,对类似gyrA、parC基因突变称为抗药性,其他生理性适应机制称为耐药性,其抗药性突变和耐药性调节共同决定了抗药性表型,但对其加以区分并分别研究,更容易集中研究单纯的抗药性突变机制,采取相应的用药措施。
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