科研产出
楸子叶片酵母文库构建及甘油二酯激酶MpDGK7互作蛋白鉴定
《核农学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：为探究MpDGK7参与调控苹果对非生物胁迫响应的机制，本研究通过构建苹果属植物楸子（Malus prunifolia）叶片的酵母双杂交cDNA文库，筛选与甘油二酯激酶MpDGK7互作的蛋白并进行验证。结果显示，本研究构建的cDNA文库库容达到1.5×107 CFU，重组率100%，平均插入片段长度大于1 200 bp。利用MpDGK7构建诱饵载体pBT3-N-MpDGK7，质粒无毒性且不存在自激活，通过共转化方法从文库中筛选到13个与MpDGK7互作的蛋白。选取4个代表性互作蛋白（KAN4、MYC2、BTB/POZ和金属硫蛋白）进行点对点验证，发现它们均与MpDGK7发生互作。双分子荧光互补（BiFC）验证结果表明，MpKAN4与MpDGK7互作主要发生在细胞膜和细胞核上，MpBTB与MpDGK7互作主要发生在细胞膜上。因此，推测MpDGK7可能通过参与KAN4、MYC2、BTB/POZ和金属硫蛋白等介导的胞内信号转导过程来影响苹果对逆境胁迫的响应。本研究结果为进一步阐明DGK基因参与苹果抗逆分子调控的机理奠定了基础。
关键词： 苹果 MpDGK7 酵母双杂交 双分子荧光互补 蛋白互作
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棉花GhSAP基因的克隆、分析及互作蛋白的筛选
《分子植物育种 》 2022 北大核心 CSCD
摘要：器官大小是植物重要的形态性状之一.为解析棉花GhSAP在调控器官大小方面的功能及机制,我们对该基因的基本生物学特性、亚细胞定位及其互作蛋白进行了系统分析.结果显示,GhSAP含有3个WD40 repeat功能区,具有两个外显子和一个内含子.亚细胞定位结果显示,GhSAP-GFP荧光信号与DAPI共定位在细胞核上.利用酵母双杂交技术共筛选到40个GhSAP的互作蛋白,结合转录组测序结果和基因功能分析,发现Gh_D06G0323(GhAUF1)与GhSAP共表达,推测GhAUF1可能与GhSAP互作共同调控棉花器官的发育.本研究对GhSAP基因进行了深入分析,为进一步揭示植物器官大小调控机制提供了依据.
关键词： 棉花(Gossypium hirsutum L.) GhSAP 亚细胞定位 酵母双杂交
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