科研产出
二斑叶螨为害对草莓叶片H2O2、MDA含量以及部分防御酶活性的影响
《环境昆虫学报 》 2022 北大核心 CSCD
摘要:本文旨在探究二斑叶螨Tetranychus urticae为害对草莓Fragaria×ananassa Duch.叶片内过氧化氢(H2 O2)、丙二醛(MDA)含量以及部分防御酶活性的影响.在草莓苗上接种不同数量(5~25头)的二斑叶螨,分别在接种后的24 h、48 h和72 h取样,分析草莓叶片内H2 O2、MDA的含量以及部分防御酶的活性.结果显示,二斑叶螨为害的草莓叶片内H2 O2和MDA的含量以及超氧化物歧化酶(SOD)的活性随着时间的延长而呈现先升后降的趋势,在二斑叶螨持续为害草莓叶片24 h、48 h和72 h时,受损草莓叶片中H2 O2的含量均显著高于对照(P<0.05),不同密度二斑叶螨为害的草莓叶片中H2O2的含量均显著高于对照(P<0.05),但与取食时间关系不大.当为害时间达到48 h时,MDA的含量和SOD的活性均达到最高峰,此时它们均与二斑叶螨的密度密切相关.当二斑叶螨为25头/叶时,MDA的含量和SOD的活性分别约是对照的3.6倍和10倍.过氧化物酶(POD)和过氧化氢酶(CAT)的活性随时间延长不断升高,均在二斑叶螨为害72 h时达到最高峰.同时,二斑叶螨的为害时间和为害密度之间存在一定的交互作用.以上结果表明草莓叶片主要通过调节其体内H2 O2和MDA的含量以及各种防御酶活性的变化,对二斑叶螨的为害产生应激反应.
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肉牛肌肉细胞的分离培养和鉴定及其氧化应激模型的建立
《动物营养学报 》 2020 北大核心 CSCD
摘要:本研究采用组织块法分离培养获得肉牛肌肉细胞并进行鉴定,利用过氧化氢(H2O2)构建氧化应激模型,为深入研究氧化应激对肉牛肌肉生长发育和肉品质的影响机制提供技术支撑.选用体重为252 kg的利鲁(利木赞×鲁西黄牛)杂交公牛背最长肌,利用组织块培养法分离培养肌肉细胞.通过形态学观察、免疫荧光法及流式细胞仪等手段对细胞进行鉴定.采用不同浓度(0、50、100、150、200、250、300、350、400、450μmol/L)的H2O2处理细胞24 h,通过观察细胞形态、检测细胞存活率及氧化还原状态,筛选适宜作用浓度.然后利用该浓度H2O2处理细胞不同时间(0、0.75、1.5、3、6、12、24 h),通过分析确定适宜作用时间.结果表明:1)分离获得的细胞长势良好,形状细长,呈纺锤体形和梭形.免疫荧光法和流式细胞仪鉴定肌肉细胞的特异性蛋白(生肌决定因子1和配对盒基因7)均得到较高表达.2)视野内细胞数量随H2O2浓度升高逐渐减少,至450μmol/L时,细胞发生明显死亡现象.细胞存活率随H2O2浓度的升高显著降低,与0浓度H202处理相比,300μmol/L时降至65.4%(P<0.05),450μmol/L时仅为6.7%(P<0.05).细胞活性氧(ROS)水平先略微降低后逐渐升高(P<0.05),超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性先升高后逐渐降低(P<0.05),丙二醛(MDA)和蛋白质羰基(PC)含量逐渐升高(P<0.05),8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)含量先升高后降低(P<0.05).3)细胞存活率随300μmol/L H2O2处理时间的延长逐渐降低,与0 h相比,6 h降至61.2%(P<0.05),12 h降至47.4%(P<0.05),但在24 h时略有升高(P<0.05).随着处理时间的延长,细胞ROS水平先升高后逐渐降低(P<0.05),SOD和CAT活性先升高后降低(P<0.05),MDA、PC和8-OHdG含量均逐渐升高(P<0.05).综上所述,本研究通过组织块培养法分离培养获得较高纯度的肉牛肌肉细胞,并成功构建氧化应激模型,H2O2的适宜作用浓度和时间分别为300μmol/L和6 h.
关键词: 肉牛 肌肉细胞 细胞培养 细胞鉴定 过氧化氢 氧化应激模型
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