科研产出
单子叶植物表达载体pUN3300的构建
《山东农业科学 》 2013
摘要:植物双元表达载体在植物基因工程研究中具有重要作用,表达载体所包含的结构元件,如启动子、多克隆位点、筛选标记等,对植物遗传转化效率、外源基因表达强度及遗传稳定性等具有重要影响。本研究中,为提高目的基因对单子叶植物的遗传转化效率,对植物表达载体pCAMBIA3300进行改造,在原有以bar基因作为选择标记的基础上,采用不完全酶切的方法添加了Ubiquitin启动子,经酶切、测序表明,植物双元表达载体pUN3300构建成功。该载体对于研究外源基因功能、植物性状改良及新品种的培育,具有重要的价值。
关键词: 单子叶植物 表达载体 pUN3300 Ubiquitin启动子 bar基因
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扩张蛋白Swollenin基因香菇表达载体构建及其初步转化
《食品科学 》 2011 北大核心 CSCD
摘要:构建含有Swollenin基因(swo基因)的香菇表达载体,并通过PEG(polyethylene glyeol)介导的原生质体转化法实现对香菇的遗传转化,转化效率约为1个转化子/μg质粒DNA。PCR和杂交检测结果表明,swo基因已经整合到香菇的基因组中;栽培实验结果表明,两个转化子都能正常出菇,而且转化子Ⅱ表现出优良的生物学性状,将swo基因转化到香菇中对香菇新品种的培育进行探索。
关键词: 香菇 Swollenin基因 表达载体 遗传转化
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大白菜PAT1基因的克隆及其表达载体的构建
《山东农业科学 》 2009
摘要:根据GenBank中大白菜(Brassica campestris L. ssp. pekinensis)基因组测序结果,分析了大白菜PAT1(phytochrome A signal transduction)基因的内含子和外显子。通过拼接外显子,获得了大白菜PAT1基因的cDNA编码序列。根据编码区序列,设计并合成了一对引物;利用这对引物,采用RT-PCR技术扩增出大白菜福山包头PAT1基因(CcPAT1)的全长cDNA序列。CcPAT1编码区共1 500 bp,与拟南芥PAT1相似性为85.03%。同时构建了含有35S启动子的pCAMBIA-2300-CcPAT1过表达载体,并利用PAT1 5′端特异区域构建了pFGC-1008-PAT1RNAi(RNA interference)载体,以备将来研究大白菜CcPAT1基因的功能。
关键词: 大白菜 PAT1基因 cDNA克隆 表达载体 RNAi
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