科研产出
甘油二酯对2型糖尿病肾病大鼠肾脏保护机制
《营养学报 》 2016 北大核心 CSCD
摘要：目的探讨甘油二酯(DAG)对糖尿病肾病SD大鼠肾组织蛋白激酶C(PKC)表达和氧化应激的影响。方法SD雄性大鼠40只,选10只为正常对照组(I)用基础饲料喂养。另30只,采用高脂高糖饲料喂养结合链脲佐菌素(STZ)注射诱导2型糖尿病肾病模型(2型DN)。DN成模20只,均分为甘油三酯组(TAG,II)和甘油二酯两组(DAG,III)分别用TAG、DAG饲料持续喂养8w两组饲料组分(%)除TAG、DAG不同外,其余均相同,为:酪蛋白纤维素粉4,矿物质混合物3.5,维生素混合物1,淀粉61.5。实验第2、4、6、8w分别检测空腹血糖(FBG);实验结束前检测24h尿蛋白(UPRO)、血肌酐(SCR);采用苏木精-伊红(HE)染色和Massion染色观察肾脏的病理变化;采用试剂盒法检测肾皮质丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽过氧化酶(GSH)活性;免疫组化法检测肾脏中PKC的表达。结果与II组比较,III组可以显著降低模型大鼠FBG(P<0.05),UPRO排泄率显著减少(P<0.05),MDA含量显著下降(P<0.05),肾组织病理改变减轻,并且肾组织内PKC表达下调(P<0.05)。结论 DAG能改善DN大鼠肾功能,抑制氧化应激反应,下调PKC表达,延缓DN的发生发展;推测DAG保护2型糖尿病大鼠肾脏的机制与其有关。
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着色与非着色苹果品种中磷酸化蛋白质的鉴定与分析
《中国农业科学 》 2016 北大核心 CSCD
摘要：【目的】苹果着色是一个重要的质量性状,构建苹果磷酸化蛋白质组并进行鉴定与分析,了解在苹果着色过程中的蛋白质磷酸化,为进一步阐明苹果着色机理提供参考。【方法】以着色‘嘎拉’和非着色‘金冠’两个品种苹果果皮为试材提取总蛋白,用Ti O2富集磷酸化肽段,对富集到的磷酸化肽段进行高效液相色谱分离,利用质谱鉴定磷酸化肽段,采用Mascot2.2和Proteome Discoverer1.4(thermo)软件进行蛋白质查库鉴定,使用的数据库为Uniprot_Maloideae.fasta。对鉴定到的磷酸化肽段和蛋白质进行分析,找出着色与非着色苹果品种中有差异的磷酸化蛋白质及其修饰位点。【结果】在着色苹果品种中鉴定到1 323个蛋白质、3 339个肽段和225个磷酸化肽段,发现磷酸化蛋白质约200—225种;在非着色苹果品种中鉴定到569个蛋白质、1 152个肽段和128个磷酸化肽段,发现磷酸化蛋白质约117—128种。比较分析表明,43个磷酸化肽段仅在非着色苹果品种中发现,139个磷酸化肽段仅在着色苹果品种中发现,在着色苹果品种中有更多的蛋白质发生了磷酸化,其中质膜H+-ATPase在两个苏氨酸位点发生磷酸化,过敏原蛋白和两个蛋白激酶在丝氨酸位点发生磷酸化,3个转录因子、1个钾转运蛋白和1个受体激酶都发生磷酸化。在两个苹果品种鉴定出的蛋白质中,发生蛋白质磷酸化的位点主要是丝氨酸,其次是苏氨酸,在酪氨酸位点发生蛋白质磷酸化很少。蛋白质WD40和花青苷合成途径中的相关酶蛋白C4H、4CL、CHS、CHI、F3′H、FLS、LDOX和UFGT在着色过程中未发生磷酸化。在着色和非着色苹果品种中都存在MYBR转录因子,并且都发生了蛋白质磷酸化。【结论】在着色苹果品种中产生了一些特有的磷酸化蛋白质,其中包括已知与着色相关的质膜H+-ATPase,苹果着色可能受到蛋白质磷酸化的影响。
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花生蛋白激酶基因AhSTK的克隆与序列分析
《山东农业科学 》 2013
摘要：从优质花生鲁花14的cDNA文库中发现一条序列,全长为1 399 bp,3'端含有polyA尾,通过blastx搜索得知其为蛋白激酶基因,命名为AhSTK。以该花生cDNA序列为模板设计引物,克隆得到花生Ah-STK基因。序列分析表明,AhSTK基因的开放阅读框长度为1 080 bp,编码359个氨基酸,预测其分子量为38.9 kD,等电点为6.42,编码的蛋白质无信号肽,无跨膜结构,预测定位于细胞质。与其他植物中蛋白激酶的氨基酸序列比对发现,与大豆GmSTK蛋白同源性最高。器官特异性分析发现,该基因在花生根中表达量较高,而在花中表达量较低。花生AhSTK基因的克隆为进一步研究其生物学功能和应用奠定了基础。
关键词： 花生 蛋白激酶 AhSTK蛋白 序列分析 器官特异性表达
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