金黄色葡萄球菌聚集因子A(Clfa A)功能区基因的克隆及真核表达质粒构建

魏春梅; 杨宏军; 彭广能; 何洪斌; 王长法; 高运东; 仲跻峰; 《家畜生态学报 》 2010

摘要：粘附素蛋白是金黄色葡萄球菌感染早期最重要的致病因子,研究根据金黄色葡萄球菌聚集因子A(clfa A)基因,设计合成特异性引物,以国内奶牛乳腺炎临床分离株金黄色葡萄球菌基因组为PCR模板,进行clfa A基因的克隆,并连接入pMD18-T载体进行测序和序列分析,然后经BamHⅠ和XbaⅠ双酶切后构建真核表达载体并进行鉴定。结果表明,以金黄色葡萄球菌标准株为对照,国内分离株多数在990 bp处扩增到特异性条带,经测序鉴定,与Genebank发表的金黄色葡萄球菌clfa A序列同源性为99%;构建的真核表达质粒通过PCR和双酶切鉴定证明构建成功,为研究核酸疫苗奠定基础。

关键词： 乳腺炎 金黄色葡萄球菌 聚集因子A