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金黄色葡萄球菌聚集因子A(Clfa A)功能区基因的克隆及真核表达质粒构建

文献类型： 中文期刊

作者： 魏春梅 1 ; 杨宏军 2 ; 彭广能 2 ; 何洪斌 2 ; 王长法 2 ; 高运东 2 ; 仲跻峰 2 ;

作者机构： 1.山东省农科院奶牛研究中心

2.山东省农科院奶牛研究中心;四川农业大学动物医学院

关键词： 乳腺炎;金黄色葡萄球菌;聚集因子A

期刊名称： 家畜生态学报

ISSN： 1673-1182

年卷期： 2010 年 31 卷 04 期

页码： 73-76

摘要： 粘附素蛋白是金黄色葡萄球菌感染早期最重要的致病因子,研究根据金黄色葡萄球菌聚集因子A(clfa A)基因,设计合成特异性引物,以国内奶牛乳腺炎临床分离株金黄色葡萄球菌基因组为PCR模板,进行clfa A基因的克隆,并连接入pMD18-T载体进行测序和序列分析,然后经BamHⅠ和XbaⅠ双酶切后构建真核表达载体并进行鉴定。结果表明,以金黄色葡萄球菌标准株为对照,国内分离株多数在990 bp处扩增到特异性条带,经测序鉴定,与Genebank发表的金黄色葡萄球菌clfa A序列同源性为99%;构建的真核表达质粒通过PCR和双酶切鉴定证明构建成功,为研究核酸疫苗奠定基础。

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