科研产出
PH826噬菌体与抗生素联用有效抑制多重耐药铜绿假单胞菌生物被膜的形成
《微生物学报 》 2024 北大核心 CSCD
摘要：【目的】铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）是一种重要的革兰氏阴性病原体，可以加重囊性纤维化患者的肺部感染，最终会导致患者的死亡。然而由于多重耐药（multi-drug resistant,MDR）和泛耐药（pan-drug resistant, PDR）铜绿假单胞菌菌株的出现，使其防控变得更为严峻。【方法】从养殖场污水中分离能有效裂解多重耐药铜绿假单胞菌的噬菌体，研究其形态特征、生物学特性、宿主谱范围、基因组特征和体外抑菌能力等，并采用噬菌体和抗生素联用的方法进行生物被膜的抑制试验。【结果】透射电子显微镜的形态分析和基因组分析结合表明，该噬菌体属于Nankokuvirus病毒属。生物学特性试验表明，PH826具有广泛的温度稳定性（4-60℃）和pH稳定性（3.0-11.0）。宿主谱测试显示，PH826可以裂解13株铜绿假单胞菌（包括人源和动物源），体外抑菌试验显示，PH826在感染复数（multiplicity of infection, MOI）分别为10、1、0.1时对铜绿假单胞菌均有强烈的裂解作用。根据基因组分析，PH826噬菌体的基因组大小为87 956 bp,G+C含量为54.70%，编码165个开放阅读框（open reading frames, ORFs），并预测携带有裂解酶。值得注意的是，在24 h和48 h内，PH826和环丙沙星联用在1×、2×、4×最小抑菌浓度（minimum inhibitory concentration, MIC）的条件下都减少了80%以上的生物被膜的形成；PH826和美罗培南联用在24h和48h内，在2×MIC和4×MIC的条件下也减少了80%以上的生物被膜的形成。【结论】PH826可能是一种潜在的消毒剂和治疗剂，可以单独使用或与抗生素联合使用，用于预防和治疗致病性铜绿假单胞菌。
关键词： 噬菌体 铜绿假单胞菌 生物被膜 多重耐药性 抗生素
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奶牛乳腺炎葡萄球菌生物被膜形成及相关基因分析
《中国农业科学 》 2011 北大核心 CSCD
摘要：【目的】研究临床分离的奶牛乳腺炎葡萄球菌生物被膜形成能力,相关基因的分布及二者之间的关系;【方法】利用通用硅胶片法培养葡萄球菌生物被膜,经充分洗涤后对生物被膜进行银染定性判断菌株形成生物被膜的能力,通过生物被膜菌落结晶紫染色法定量检测菌株生物被膜的形成能力,并用扫描电镜观察被膜结构,对葡萄球菌bap、icaAD、icaBC、sar、agr、sigB、clfaA、clfaB、fnbpA和fnbpB进行PCR扩增检测。【结果】银染法定性结果显示137株葡萄球菌中有120株形成肉眼可见的生物被膜,生物被膜形成率为87.6%;结晶紫染色定量检测与硅胶粘附的有132株,不粘附的有5株。试验所用的137株葡萄球菌中,57株能扩增出bap基因;有43株和54株分别能扩增出icaAD和icaBC;有73株、49株和38株分别扩增出sigB、sar和agr;分别有76株和50株染色体中存在clfaA和clfaB;fnbpA和fnbpB分别在52株和26株菌株中扩增出。【结论】推测bap、sigB、sar、icaAD和icaBC基因是生物被膜形成的重要相关基因;agr及粘附素基因clfaA、clfaB、fnbpA和fnbpB对生物被膜形成的作用不明显。
关键词： 奶牛乳腺炎葡萄球菌 生物被膜 银染法 结晶紫染色法
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