牛传染性鼻气管炎病毒SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法的建立及应用

任亚初; 楚会萌; 程凯慧; 解晓莉; 张亮; 孙阳阳; 杨美; 杨宏军; 唐月新; 刘文浩; 李开荣; 《中国预防兽医学报 》 2019 北大核心 CSCD

摘要：为快速定量检测牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV),本研究根据IBRV的gD基因保守序列,设计合成一对特异性引物,建立了能够快速检测IBRV的SYBRGreenⅠ荧光定量PCR方法.特异性试验结果显示,该方法与引起牛消化道和呼吸道疾病的其它几种病毒均无交叉反应,特异性较强;敏感性试验结果显示,该方法对质粒标准品的最低检出限达6.1×101拷贝/μL,敏感性较高且高于普通PCR方法;重复性实验结果显示,批内、批间变异系数均小于3.0%,重复性良好.利用该方法检测了3个规模化奶牛场送检的47份奶牛鼻拭子样品,结果显示检出了12份阳性样品,与常规PCR检测方法的相比,总符合率为97.87%.本研究建立的检测IBRV的SYBRGreenⅠ荧光定量PCR方法准确可靠,为IBRV的早期快速检测和定量分析提供了技术支撑.

关键词： 牛传染性鼻气管炎 荧光定量PCR gD基因 诊断