基于DNA条形码和特异性PCR技术鉴别蚂蟥及其常见伪品

解盈盈; 李军; 汪冰; 于雅萌; 栾永福; 梅桂雪; 张全芳; 戴忠; 林永强; 《中国药事 》 2023

摘要：目的：建立蚂蟥特异性PCR鉴别方法，能够快速准确地鉴别蚂蟥与其常见伪品。方法：通过分析蚂蟥与其常见伪品的细胞色素C氧化酶亚基Ⅰ（COⅠ）序列，寻找蚂蟥SNP变异位点，设计特异性引物；通过对退火温度、循环次数、DNA模板量及Taq酶等关键因素的考察，确立最优反应体系及条件，并将特异性PCR方法应用到水蛭（蚂蟥）粉末中进行药材粉末的基原鉴别，同时为保证试验结果的准确性，将PCR扩增产物进行一代测序。结果：特异性PCR结果表明蚂蟥在400～600 bp有单一明亮条带，常见混伪品则无此条带，试验结果与一代测序结果一致，为蚂蟥。结论：该方法能够将蚂蟥与其常见伪品菲牛蛭、东北小水蛭、黑条、小黑条等区别，且能鉴别水蛭（蚂蟥）粉的基原，为提升中药监管力度，打击中药掺伪行为提供了强有力的技术支持。

关键词： DNA条形码 聚合酶链式反应(PCR)法 蚂蟥 混伪品 蚂蟥粉