科研产出
黄粉虫抗菌肽的诱导·分离及其抗菌活性研究
《安徽农业科学 》 2024
摘要：[目的]探讨不同方法诱导对黄粉虫抗菌肽活性的影响,为黄粉虫抗菌肽的修饰改造、分子克隆、外源表达等奠定基础.[方法]选7龄、8龄、9龄的黄粉虫幼虫,以巴氏杆菌和沙门氏菌为诱导菌采用微量注射法、针刺法诱导抗菌肽,对不同菌液浓度和不同方法诱导的不同龄期黄粉虫幼虫抗菌肽的抑菌效果进行研究.[结果]①黄粉虫龄期对抗菌肽活性有显著影响.釆用巴氏杆菌和沙门氏菌作为诱导菌,对7龄、8龄和9龄黄粉虫进行诱导,在诱导处理中,8龄幼虫诱导的抗菌肽活性显著大于其他龄期幼虫诱导的抗菌肽活性(P<0.05).②不同菌液浓度诱导黄粉虫幼虫产生的抗菌肽抑菌活性存在差异.菌液浓度为对数期浓度稀释100倍时抗菌肽活性显著大于其他稀释倍数诱导的抗菌肽活性(P<0.05).③不同方法诱导产生的抗菌肽抑菌活性存在差异.微量注射诱导的抗菌肽活性显著大于针刺诱导的抗菌肽活性(P<0.05).④2种细菌诱导的抗菌肽活性有显著差异.采用沙门氏菌诱导的抗菌肽最高活性显著大于采用巴氏杆菌诱导的抗菌最高活性(P<0.05).[结论]黄粉虫抗菌肽的活性受黄粉虫龄期、诱导源微生物种类、菌液浓度、诱导方法的影响.该研究中,以8龄黄粉虫为试验动物,采用对数期沙门氏菌液稀释100倍进行微量注射法诱导,所获得的抗菌肽活性最好.
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类激素小肽在花生胁迫应答中的应用与展望
《花生学报 》 2018 北大核心
摘要：盐碱非生物胁迫和细菌生物胁迫会严重制约花生生长发育,鉴于目前花生传统育种的长周期性和花生基因组解析时间的滞后,花生育种与胁迫关系的研究和应用进展较为缓慢。近年来类激素物质"小肽"的发现及其抗菌、耐盐碱等特性的鉴定,为提高花生抵御环境胁迫能力开辟了新的研究热点。小肽作为一种生长信号调节因子,在环境胁迫响应过程中发挥了至关重要的作用。但目前关于小肽与胁迫间关系的研究尚处于起步阶段,且主要集中于水稻、拟南芥和烟草等模式植物中。本文总结了花生多肽的本质、功能作用和类激素小肽在胁迫响应中的研究进展,并对小肽在提高花生应对环境胁迫能力方面的应用价值进行展望,为花生小肽在环境胁迫中的应用进行探讨。
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重组鸡Cathelicidins类抗菌肽的融合表达及其对金黄色葡萄球菌抗菌活性的研究
《中国畜牧兽医 》 2013 北大核心
摘要：Cathelicidins抗菌肽在家禽天然免疫系统中发挥重要作用,本研究将已构建的含Cathelicidins抗菌肽成熟肽的阳性克隆菌株Rosetta(DE3)/pET30-CathL1S、pET30-CathL2S、pET30-CathL3S分别在37℃、1.0mmol/L IPTG的条件下进行诱导表达。SDS-PAGE和Western blotting分析结果表明,Cathelicidins成熟肽片段均在大肠杆菌中以融合形式成功表达,表达产物的表观分子质量分别为7、8、7.5ku。琼脂糖孔穴扩散法检测结果显示,表达产物对多种革兰氏阴性菌和阳性菌均具有很好的抑制活性,其对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、藤黄微球菌(Micrococcusluteus)、大肠杆菌(Escherichia coli)、鸡白痢沙门氏菌C79-13(Salmonella pullorum)、巴氏杆菌、鸭疫里默氏杆菌及绿脓杆菌等供试菌株均有较强的抑制作用,尤其对抗生素耐药菌株有明显的抑制作用。以雏鸡为实验模型研究重组抗菌肽对金黄色葡萄球菌的体内抗菌活性,结果表明,注射中、高剂量CathL-1抗菌肽试验组(5、10mg/kg),在试验结束后取肝脏组织匀浆液涂布于TMP平板,未分离到葡萄球菌。各抗菌肽试验组平均增重均高于感染对照组,其中低剂量抗菌肽试验组(2.5mg/kg)体内抑菌效果虽与普通抗生素相当,但其增重效果尤为明显。
关键词： 抗菌肽 Cathelicidins 融合表达 纯化 抑菌活性 金黄色葡萄球菌
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鸡β-防御素-1基因在大肠杆菌中的融合表达及其初步纯化与抗菌活性测定
《家禽科学 》 2013
摘要：防御素是广泛存在于动、植物体内的一大类阳离子抗菌肽,它们在宿主—家禽天然免疫中发挥着重要作用,是机体抵御外界病原微生物入侵的一道重要防线,在鸡体内只存在Gallinacins类β-防御素。鸡β-防御素-1(Gal-1)对多种致病菌都具有杀菌作用,具有很好的药用开发前景。通过PCR技术从重组质粒pMD-Gal1中克隆出Gal-1基因成熟肽编码区,将该基因克隆至原核表达载体pET-30a(+)中,构建重组质粒pET30a-Gal1,将该质粒转化大肠杆菌Rosetta(DE3)菌株。筛选阳性克隆菌株,用浓度为1.0mmol/L的IPTG进行诱导表达。SDS-PAGE分析表明,Gal-1基因在大肠杆菌中以融合形式成功表达,表达产物表观分子量约为12kDa。对融合蛋白表达条件进行优化,提高可溶组分所占比例。表达上清用Ni2+-NTA Sepharose 4B进行亲和层析纯化,在洗脱液中显示单一条带。琼脂糖孔穴扩散法检测显示,表达产物对多种革兰氏阴性菌和阳性菌均具有明显的抑制活性。Gal-1融合蛋白成功表达为进一步研究鸡β-防御素的功能奠定基础。
关键词： 抗菌肽 β-防御素-1(Gal-1) 融合表达 分离纯化 亲和层析 抑菌活性
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抗菌肽histatherin研究进展
《家畜生态学报 》 2011
摘要：抗菌肽产于机体组织、具有广谱抗菌活性和独特抗菌的机制。对抗菌肽的研究有助于开发抗菌肽药物、进行动物抗性育种和培育抗菌肽转基因动物。论文对一种新的牛抗菌肽histatherin的研究进展进行概述。
关键词： 抗菌肽 抗菌肽药物 Histatherin
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