基于已有序列信息快速获得花生目的序列的方法(英文)

王传堂; 杨新道; 陈殿绪; 张建成; 刘光臻; 禹山林; 《花生学报 》 2004

摘要：提出了一套基于已有DNA序列信息快速获得花生目的序列的技术流程。运用花生籽仁未成熟叶片简单预处理PCR技术,根据一个种子中特异表达的基因cDNA序列设计特异性引物,用TaqDNA聚合酶进行PCR扩增,4个花生基因型中有3个得到预期长度的产物。随后取其中育种品系02 B4籽仁未成熟叶片,简单预处理后采用PyrobestDNA聚合酶作高保真扩增,得到产物后直接测序。结果表明,该基因片段与已报道的花生PSC33羽扇豆球蛋白cDNA序列表现出高度同源性。本研究为分离其编码区上下游序列奠定了基础。

关键词： 花生 种子特异性表达 序列信息 分离 方法