科研产出
UPEC双组分信号系统KguS/KguR调控基因缺失株的构建及其生长特性研究
《南京农业大学学报 》 2018 北大核心 CSCD
摘要：[目的]构建尿道致病性大肠杆菌(uropathogenic Escherichia coli,UPEC) CFT073株的双组分信号系统Kgu S/KguR调控的c5032-c5037基因的缺失株,并研究基因缺失株在有氧和厌氧条件下的生长特性.[方法]运用Red重组系统将带有c5032-c5037基因同源臂的氯霉素抗性基因取代c5032-c5037基因,在温度敏感型质粒p CP20作用下消除氯霉素抗性基因,构建基因缺失株CFT073Δc5032-c5037,用PCR和基因测序验证基因敲除是否成功,测定有氧和厌氧条件下CFT073Δc5032-c5037在以α-酮戊二酸为唯一碳源的M9培养基中培养不同时间的菌液D600值.[结果]构建了CFT073Δc5032-c5037,PCR验证及基因测序结果均表明已成功敲除c5032-c5037基因;厌氧条件下CFT073Δc5032-c5037在以α-酮戊二酸为唯一碳源的M9培养基中生长比野生型菌株CFT073缓慢,且差异极显著(P<0.01),但在有氧条件下二者的生长无显著差异.[结论]成功构建了基因缺失株CFT073Δc5032-c5037,并试验证实Kgu S/KguR调控的c5032-c5037基因在厌氧条件下参与α-酮戊二酸的利用,为进一步研究Kgu S/KguR在UPEC中的代谢适应机制奠定了基础.
关键词： 尿道致病性大肠杆菌 Kgu S/KguR c5032-c5037基因 Red重组系统
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UPEC双组分信号系统KguS/KguR调控基因缺失株的构建及其生长特性研究
《南京农业大学学报 》 2018 北大核心 CSCD
摘要：[目的]构建尿道致病性大肠杆菌(uropathogenic Escherichia coli,UPEC) CFT073株的双组分信号系统Kgu S/KguR调控的c5032—c5037基因的缺失株,并研究基因缺失株在有氧和厌氧条件下的生长特性。[方法]运用Red重组系统将带有c5032—c5037基因同源臂的氯霉素抗性基因取代c5032—c5037基因,在温度敏感型质粒p CP20作用下消除氯霉素抗性基因,构建基因缺失株CFT073Δc5032—c5037,用PCR和基因测序验证基因敲除是否成功,测定有氧和厌氧条件下CFT073Δc5032—c5037在以α-酮戊二酸为唯一碳源的M9培养基中培养不同时间的菌液D600值。[结果]构建了CFT073Δc5032—c5037,PCR验证及基因测序结果均表明已成功敲除c5032—c5037基因;厌氧条件下CFT073Δc5032—c5037在以α-酮戊二酸为唯一碳源的M9培养基中生长比野生型菌株CFT073缓慢,且差异极显著(P<0.01),但在有氧条件下二者的生长无显著差异。[结论]成功构建了基因缺失株CFT073Δc5032—c5037,并试验证实Kgu S/KguR调控的c5032—c5037基因在厌氧条件下参与α-酮戊二酸的利用,为进一步研究Kgu S/KguR在UPEC中的代谢适应机制奠定了基础。
关键词： 尿道致病性大肠杆菌 Kgu S/KguR c5032—c5037基因 Red重组系统
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