基因C型鸭肝炎病毒VP1基因的克隆表达及其多克隆抗体的制备

赵立娜; 崔言顺; 任建亭; 李建亮; 黄兵; 李玉峰; 马秀丽; 《浙江农业学报 》 2011 北大核心 CSCD

摘要：采用RT-PCR方法,扩增基因C型DHV JFX08株的VP1基因,与pMD18-T载体进行连接,构建新型DHVVP1基因克隆重组质粒。然后将VP1基因定向插入到pET-32a(+)表达载体中,筛选原核表达载体pET-32a-VP1,进行IPTG诱导表达。SDS-PAGE电泳分析表明,基因C型DHV-VP1基因可在大肠杆菌中稳定高效的表达。Western-blot检测表明,表达产物可与基因C型DHV阳性血清发生特异性反应。将纯化的重组蛋白免疫4周龄SPF鸡,以纯化的VP1重组蛋白和基因C型DHV全病毒分别包板,制备的抗血清ELISA效价分别可达1∶25 600,1∶51 200,表明该重组蛋白具有良好的免疫原性。

关键词： 鸭肝炎病毒 基因C型 VP1基因 克隆表达 多克隆抗体