口蹄疫病毒链特异性荧光定量RT-PCR检测方法的建立

王洪梅; 贾春涛; 胡桂学; 夏咸柱; 于力; 《黑龙江畜牧兽医 》 2015 北大核心

摘要：为了定量检测口蹄疫病毒(FMDV)的正链和负链RNA,揭示FMDV复制的分子机制,试验采用链特异性荧光定量RT-PCR(ssqRT-PCR)方法提取了FMDV的RNA,在FMDV链特异性反转录引物的5'端引入非病毒基因序列标签进行反转录,再经链特异性ssqRT-PCR扩增进行灵敏性、特异性、重复性检测。结果表明:FMDV基因组正链、负链RNA的链特异性ssqRT-PCR方法构建成功,该方法对FMDV正链和负链RNA检测的灵敏度达到1×101拷贝,具有较好的重复性和特异性。

关键词： 口蹄疫病毒(FMDV) 链特异性 非病毒基因序列标签 荧光定量RT-PCR(ssqRT-PCR) 基因组RNA 检测方法