基因工程蛋白金葡菌α-溶血素的纯化及活性检测

张海燕; 马卫明; 杨宏军; 王长法; 何洪彬; 曹永芝; 《西北农林科技大学学报(自然科学版) 》 2009 北大核心 CSCD

摘要：【目的】分离纯化基因工程重组蛋白金黄色葡萄球菌溶血素(α-hemolysin,α-HL)并检测其生物学活性,为疫苗研发奠定基础。【方法】对含pET32a+-α-HL质粒的BL21(DE3)进行诱导表达,诱导成功后,将重组菌BL21(DE3)培养物用超声波裂解,并用凝胶过滤层析法对该基因工程蛋白进行分离纯化,用Bradford法及兔红细胞分别测定纯化产物的蛋白含量和溶血比活。【结果】纯化产物在SDS-PAGE电泳中53ku处呈现出单一清晰带,达电泳级纯度。纯化产物含量约为0.1277mg/mL,溶血比活为8192HU/mg。【结论】成功获得了金黄色葡萄球菌α-HL,且所获的α-HL具有良好的溶血活性。

关键词： α-溶血素 金黄色葡萄球菌 溶血活性 基因工程蛋白 原核表达