新城疫强毒特异性反转录荧光定量PCR检测方法的建立与应用

徐敏丽; 于江; 逯璐; 张玉玉; 任素芳; 陈智; 孙文博; 郭立辉; 吴家强; 张琳; 《山东农业科学 》 2021

摘要：为建立一种敏感性高、特异性强、成本更低的新城疫病毒（Newcastle disease virus, NDV）特异性反转录荧光定量PCR（reverse transcription fluorescence quantitative PCR, RT-qPCR）检测方法,基于对所有已知NDV F基因序列特征的分析,设计了一对强毒特异性引物,以体外转录制备的RNA标准品为阳性模板,构建了标准曲线,并对该方法的敏感性、特异性和准确性进行了验证。结果表明,基于SYBR GreenⅠ嵌合荧光技术建立的检测方法能够特异性扩增NDV强毒,最低可检测1拷贝/μL的RNA,用于临床毒株的检测结果与序列测定一致,可作为适合大规模监测NDV强毒的方法和工具。

关键词： 新城疫病毒 强毒 反转录荧光定量PCR 监测