创伤弧菌溶血素基因vvhA质粒定性标准样品的研制及其在水产品检测中的应用

袁玮; 陈蕾蕾; 杨金玉; 周庆新; 裘纪莹; 赵双枝; 付恩君; 赵国琰; 陈相艳; 《山东农业科学 》 2024

摘要：针对我国缺乏适用于创伤弧菌检测的质粒标准样品的现状，本研究开展了创伤弧菌鉴定即用型定性质粒标准样品的研制和应用工作。首先构建了创伤弧菌毒力基因vvhA的重组质粒，经测序验证后制备成质粒标准样品冻干粉，然后对其进行PCR定性检测及紫外分光光度计法定量分析。均匀性检验结果表明，样品间无显著差异，均匀性良好，符合预期目标；短期稳定性检验结果表明，样品能在4℃、37℃条件下稳定保存14天；长期稳定性检验结果表明，样品能在-20℃条件下稳定保存至少12个月。研究结果表明，创伤弧菌质粒定性标准样品的均匀性和稳定性均符合国家定性标准样品的要求，为创伤弧菌的快速、高通量的定性鉴定分析提供了可靠的参考物质。将标准样品应用于鱼类、贝类等10份海鲜类食品样品的检测中，经传统培养法验证，检测结果准确无误。本研究所研制的创伤弧菌质粒定性标准样品具有较好的商业应用潜力，为其在食品检测领域的推广应用奠定了重要基础。

关键词： 创伤弧菌 质粒定性标准样品 水产品 检测