专利类型: 中国发明申请
专利权人: 山东省花生研究所
发明人: 单世华;万书波;李春娟;张廷婷;闫彩霞
专利号: CN200910152267.1
摘要: 本发明提供一种花生叶片基因组DNA的提取方法,该方法包括如下步骤:(1)在无菌花生叶片中滴入0.4~0.6mL液氮后将叶片捣碎,并加入0.2~0.3mL提取液;(2)加入适量浓度为20%的SDS(W/V)后轻缓摇动离心管,此步骤的目的是使细胞破裂释放DNA。将所得产物进行温育;(3)加入适量的经4℃预冷处理的KAc缓冲液,混合均匀后进行第一次离心分离;(4)将所得上清液加入-20℃预冷2hr-3hr的异丙醇,混合均匀后在冰冻条件下放置15~25分钟;(5)将上一步骤所得上清液进行第二次离心分离以沉淀核酸,其中所述第二次离心分离的条件与第一次相同;离心后用预冷5小时以上的乙醇漂洗沉淀,漂洗后干燥沉淀,随后用适量Tris-EDTA(TE)溶液干燥沉淀。
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