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针对NSP4基因的shRNA抑制牛轮状病毒的体外增殖

文献类型： 会议论文

第一作者： 陈方园

作者： 陈方园 1 ; 何洪彬 2 ; 王洪梅 2 ; 武建明 2 ; 高运东 2 ; 刘晓 2 ; 杨宏军 2 ; 王长法 2 ; 仲跻峰 2 ;

作者机构： 1.山东省农业科学院奶牛研究中心,济南 250100 东北农业大学 生命科学学院,哈尔滨 150030

2.山东省农业科学院奶牛研究中心,济南 250100

关键词： 轮状病毒;shRNA;NSP4基因

会议名称： 中国畜牧兽医学会2010学术年会暨第二届中国兽医临床大会

主办单位： 中国畜牧兽医学会

页码： 471-475

摘要： 本研究根据牛轮状病毒(Bovino rotavirus，BRV)的NSP4基因序列，设计并构建了shRNA重组慢病毒载体RNAi-H1-89，利用脂质体介导法，将RNAi-H1-89与辅助质粒共转染293细胞，包装shRNA重组慢病毒;重组慢病毒感染MA104细胞24h后继续接种BRV，以针对LacZ基因的shRNA重组慢病毒为对照，48h后与LacZ shRNA对照比较，RNAi-H1-89明显抑制MA104细胞病变;RT-PCR检测结果表明，针对NSP4基因的shRNA可特异性抑制牛轮状病毒NSP4基因表达;病毒滴度测定表明，在转染50%、75%、95%RNAi-H1-89质粒的细胞培养上清液中，病毒滴度分别是对照组的50%、20%和1 0%.上述实验结果表明，针对NSP4基因的shRNA能高效地沉默NSP4基因，并且能阻断牛轮状病毒增殖.

分类号： S858.23`S855.3

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[1]针对NSP4基因的shRNA抑制牛轮状病毒的体外增殖. 陈方园,王洪梅,杨少华,武建明,高运东,刘晓,杨宏军,王长法,仲跻峰,王立群,何洪彬. 2010

[2]NSP4基因突变的重组牛轮状病毒的拯救及其鉴定. 杨少华,何洪彬,杨宏军,陈方园,高运东,仲跻峰. 2012

[3]慢病毒介导的靶向NDV P基因shRNA对NDV复制的抑制作用. 杨少华,许传田,张琳,黄艳艳,黄庆华,胡北侠,张秀美. 2016

[4]RNA interference targeting glycoprotein D inhibits infectious bovine rhinotracheitis virus replication in MDBK cells. Song, Lingling,Zhang, Hui,Wang, Hongmei,Hou, Peili,Xia, Xianzhu,He, Hongbin. 2016

[5]兔轮状病毒病研究进展. 孙弘宇,赵巧雅,李宏梅,郭慧君,黄兵. 2021

[6]新分离牛轮状病毒及其血清型的研究. 栾婧婧,杨少华,马广强,高运东,仲跻峰,赵宏坤. 2006

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