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R-藻红蛋白标记抗体荧光探针的高效制备及其在禽流感病毒检测中的应用

文献类型： 中文期刊

作者： 颜世敢 1 ; 朱丽萍 2 ; 张玉忠 3 ; 周百成 3 ; 张秀美 4 ; 李雁冰 1 ;

作者机构： 1.中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室

2.山东轻工业学院食品与生物工程学院

3.山东大学微生物技术国家重点实验室

4.山东省农业科学院畜牧兽医研究所

关键词： R-藻红蛋白;荧光标记;固相免疫荧光检测;禽流感病毒

期刊名称： 南京农业大学学报

ISSN： 1000-2030

年卷期： 2009 年 32 卷 02 期

页码： 96-100

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 用适宜摩尔浓度的异型双功能交联剂SPDP将R-藻红蛋白与纯化的禽流感病毒H9亚型多克隆抗体交联,并经高效液相色谱纯化制备R-藻红蛋白标记抗体荧光探针。以溴化氰活化的琼脂糖微球为固相载体,采用双抗体夹心法建立固相免疫荧光检测法,以制备的R-藻红蛋白标记抗体荧光探针检测禽流感病毒H9尿囊毒。结果表明,阳性微球在蓝、绿光激发下发射桔黄色荧光,荧光明亮,无背景光干扰,特异性好,灵敏度高,可检测蛋白浓度为1.85×10-5mg.mL-1的H9亚型尿囊毒。R-藻红蛋白标记探针的检测灵敏度高于FITC标记探针,R-藻红蛋白可替代FITC或与FITC等荧光染料一起用于多色荧光免疫检测。

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