文献类型： 中文期刊

作者： 孙全喜 ¹ ; 徐洪明 ¹ ; 李春娟 ¹ ; 闫彩霞 ¹ ; 赵小波 ¹ ; 王娟 ¹ ; 苑翠玲 ¹ ; 单世华 ¹ ;

作者机构： 1.山东省花生研究所;东阿县农业技术推广站

关键词： 花生;种子特异启动子;转基因拟南芥;GUS组织化学染色

期刊名称： 核农学报

ISSN： 1000-8551

年卷期： 2020 年 03 期

页码： 460-467

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为丰富花生种子特异启动子资源,本研究利用PCR技术在花生基因组中克隆了种子贮藏蛋白基因PSC32的启动子AHSSP1,利用半定量RT-PCR检测了PSC32基因表达模式,借助NewPLACE在线分析了AHSSP1序列中存在的顺式作用元件,并构建了AHSSP1驱动GUS报告基因的表达载体,经农杆菌转化获得转基因拟南芥,经GUS组织化学染色鉴定了该启动子的功能。结果表明,PSC32基因957 bp长的启动子AHSSP1序列具备种子特异表达启动子特有的3个RY REPEAT元件。半定量RT-PCR分析发现,PSC32基因在花生成熟种子中表达,而在饱果成熟期根、茎、叶片、花、入土前的果针、成熟种子的果壳中均不表达。GUS组织化学染色发现,转基因拟南芥成熟种子以及萌发种子的子叶、下胚轴和胚根均能够被染上蓝色;长出真叶后,子叶和下胚轴仍能被染色,而根和真叶不能被染上蓝色;成年期转基因拟南芥的叶片也不能被染上蓝色。而野生型拟南芥整个生长时期均不能被染上蓝色。以上现象说明AHSSP1是一个种子特异启动子。本研究丰富了花生种子特异启动子的资源,对花生籽仁品质改良或以花生籽仁作为"生物反应器"的研究具有重要的应用价值。