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基于PCR的染色体步移中单引物扩增的克服与非特异引物的利用

文献类型： 中文期刊

作者： 刘春香 1 ; 张卫华 2 ; 孙小镭 2 ;

作者机构： 1.潍坊学院生物工程学院

2.山东省农业科学院蔬菜研究所

关键词： 单引物扩增;PCR;染色体步移

期刊名称： 中国生物化学与分子生物学报

ISSN： 1007-7626

年卷期： 2010 年 26 卷 04 期

页码： 380-385

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 基于PCR的染色体步移(PCR-Walking)方法已有许多种,包括反向PCR、连接介导的PCR、随机引物PCR等.在众多的方法中,经常存在由通用引物引起的单引物非特异扩增现象.本文综述了连接介导的PCR-Walking中单引物扩增的形成原理及克服方法.克服单引物扩增主要是使接头引物在DNA两端的接头上只有1个结合位点,从而避开单引物扩增.常用的方法有3′端加氨基修饰的不对称接头、泡泡状接头或Y字型接头及单寡核苷酸接头等方法.还介绍了2种利用通用引物非特异扩增克隆目的序列的方法:引物错配法及基于RAPD原理的单引物PCR法.

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