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高表达牛气管防御素的真核重组载体的构建及其鉴定

文献类型： 中文期刊

作者： 高小艳 1 ; 王长法 1 ; 刘顺德 2 ; 王洪梅 1 ; 刘晓 1 ; 何洪彬 1 ;

作者机构： 1.山东省农业科学院奶牛研究中心

2.宁夏大学农科院动物遗传育种与繁殖实验室

关键词： 牛气管防御素;真核表达载体;基因表达

期刊名称： 西南农业学报

ISSN： 1001-4829

年卷期： 2010 年 23 卷 06 期

页码： 2066-2069

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 根据GeneBank中牛TAP的序列设计了1对特异性引物,采用RT-PCR方法从牛气管组织扩增牛TAP基因,并克隆到pEASY-T3载体。测序结果表明,扩增的片段含有144 bp核苷酸,编码48个氨基酸,与已报道的bTAP有1个氨基酸不同。该基因与真核表达载体FG9重组,经过PCR,酶切和测序鉴定,筛选牛TAP基因重组真核表达载体。使用脂质体法将FG9-TAP重组质粒转染293T细胞,斑点ELISA检测结果表明,成功构建了高表达牛TAP基因的真核表达载体,为抗金黄色葡萄球菌转牛TAP基因奶牛培育研究奠定基础。

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