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大豆GmbZIP33基因启动子的克隆及瞬时表达分析

文献类型: 中文期刊

作者: 白丽娟 1 ; 刘薇 2 ; 王志莉 3 ; 王文婷 4 ; 吴存祥; 冯永君;

作者机构: 1.北京理工大学生命学院

2.中国农业科学院作物科学研究所

3.山东省农业科学院作物研究所

4.香港中文大学生命科学院

关键词: 大豆;拟南芥;GUS;维管组织特异性启动子

期刊名称: 大豆科学

ISSN: 1000-9841

年卷期: 2019 年 4 期

页码: 511-516

摘要: 启动子作为基因调控的重要元件,决定着下游基因表达的时空和强度特性.为研究大豆GmbZIP33基因启动子功能,在前期克隆获得GmbZIP33基因(Glyma.03G219300.1)序列的基础上,通过N-PCR(nested PCR)技术克隆了GmbZIP33 CDS上游启动子区序列(2 316 bp).利用PlantCARE在线分析软件进行顺式作用元件的预测,发现该序列上除含有TATA-box和CAAT-box等核心调控元件外,同时包括与抗逆、光响应、激素响应、蔗糖应答元件和多个与组织特异性表达相关的元件.为研究GmbZIP33启动子的表达调控特性,构建了该启动子调控报告基因GUS表达的载体,并利用农杆菌介导的花序浸染法将其转入拟南芥中,发现该启动子驱动下的GUS基因在不同组织(莲座叶、花、荚果和根)的维管束中均特异性表达;对转基因拟南芥进行实时荧光定量PCR检测发现,GUS基因在花中表达量最高,荚果中次之,表明GmbZIP33基因可能受到多种因素和蔗糖的调节并参与花荚发育的调控.

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