文献类型： 中文期刊

作者： 李欣 ¹ ; 杨少华 ¹ ; 王洪梅 ¹ ; 刘晓 ¹ ; 武建明 ¹ ; 高运东 ¹ ; 王立群 ² ; 仲跻峰 ¹ ; 何洪彬 ¹ ;

作者机构： 1.山东省农业科学院

2.东北农业大学

关键词： T7RNAP;BHK-21细胞

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2010 年 32 卷 06 期

页码： 473-475

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为建立能稳定表达T7RNA聚合酶(T7RNAP)的BHK-21细胞系以研究RNA重组疫苗,本研究从BL21(DE3)大肠杆菌中扩增T7 RNAP基因,定向克隆于质粒pcDNA3.1(+)中,经双酶切及测序鉴定,获得阳性重组质粒pcDNA3.1-T7 RNAP。用该质粒转染BHK-21细胞,经G418筛选14d后获得阳性细胞株。RT-PCR和western blot检测结果表明,建立了稳定表达T7 RNAP的BHK-21细胞系,并且在不同代次的阳性细胞中能稳定表达目的基因和蛋白,该研究为RNA病毒感染性质粒在细胞内转录及病毒拯救技术平台的建立奠定了基础。