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牛分枝杆菌esat6和cfp10蛋白的表达及在临床检测中的应用

文献类型： 中文期刊

作者： 解晓莉 1 ; 韩猛; 刘来兴; 王基隆; 杨美; 张云飞; 丁家波; 张亮; 杨宏军;

作者机构： 1.山东省农业科学院奶牛研究中心

关键词： 牛分枝杆菌;esat6和cfp10蛋白;皮肤变态反应;IFN-γ释放试验

期刊名称： 山东农业科学

ISSN： 1001-4942

年卷期： 2017 年 11 期

页码： 120-123

摘要： 本研究以牛分枝杆菌H37Rv基因组DNA为模板,扩增esat6和cfp10基因,构建重组表达载体p ET-32a(+)-esat6和p ET-32a(+)-cfp10,并通过原核表达系统分别表达重组esat6和cfp10蛋白,经Ni-NTA亲和层析法纯化后,对目的蛋白进行SDS-PAGE和Western blot验证,BCA法测定目的蛋白浓度,最后将east6和cfp10蛋白混合后用于牛结核病临床检测,并对检测数据进行分析。结果表明,牛分枝杆菌esat6和cfp10蛋白在大肠杆菌系统中获得高效表达;其混合蛋白应用于结核病检测具有较高的特异性,且在皮肤变态反应和IFN-γ释放试验两种检测方法中具有较高的符合率。说明相较于提纯结核菌素(PPD),esat6和cfp10混合蛋白具有较高的特异性和稳定性,将有希望替代PPD用于牛结核病检测。

  • 相关文献

[1]11种牛分枝杆菌抗原在牛结核病诊断中的初步评价. 高新桃,贾红,侯绍华,杨宏军,郭晓宇,袁维峰,姜一曈,朱鸿飞,鑫婷,丁家波. 2018

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