文献类型： 中文期刊

作者： 刘微 ¹ ; 李慧君 ² ; 王勇 ³ ; 孙影 ⁴ ; 李喜升 ⁵ ;

作者机构： 1.沈阳农业大学生物科学技术学院辽宁省昆虫资源工程技术研究中心沈阳农业大学植物保护学院

2.沈阳农业大学生物科学技术学院辽宁省昆虫资源工程技术研究中心山东省蚕业研究所

3.沈阳农业大学

4.沈阳农业大学生物科学技术学院

5.辽宁省蚕业科学研究所

关键词： 柞蚕;热休克蛋白70;基因克隆;序列结构;高温;诱导表达

期刊名称： 蚕业科学

ISSN： 0257-4799

年卷期： 2016 年 01 期

页码： 83-91

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 研究柞蚕热休克蛋白基因在高温胁迫下的表达变化,有助于从分子水平解析柞蚕对高温的应激反应机制。采用RTPCR技术从柞蚕蛹脂肪体组织中克隆了2个热休克蛋白70基因Ap HSP70-1(Gen Bank登录号:KR821069)、Ap HSP70-2(GenBank登录号:KT225460),2个基因的开放阅读框(ORF)均为1 905 bp,编码634个氨基酸,蛋白质具有细胞质特征基序,推测为诱导型热休克蛋白,其序列N端为高度保守的ATPase功能域,C端为多肽结合功能域,是差异位点的主要分布区域。Ap HSP70-1和Ap HSP70-2蛋白之间的序列相似度为86.91%,二者与Ap HSC70蛋白序列的相似度分别为71.82%和70.14%。半定量RT-PCR检测显示,高温(43℃)诱导后柞蚕蛹脂肪体组织中Ap HSP70-1、Ap HSP70-2基因的表达量明显升高,而Ap HSC70基因的表达量变化不大;相对于Ap HSP70-2,正常环境下Ap HSP70-1在柞蚕蛹各组织中几乎不表达,但热激后被诱导表达。qRT-PCR检测高温(43℃)诱导处理后柞蚕蛹脂肪体组织中的Ap HSP70-2表达量上调了6.32倍,Ap HSP70-1的表达量上调了4.18倍。推测克隆的2个Ap HSP70基因在柞蚕应对热激胁迫的反应中发挥重要作用。