文献类型： 中文期刊

作者： 陈方园 ¹ ; 王洪梅 ² ; 杨少华 ² ; 武建明 ² ; 高运东 ² ; 刘晓 ² ; 杨宏军 ² ; 王长法 ² ; 仲跻峰 ² ; 王立群 ² ; 何洪彬 ² ;

作者机构： 1.东北农业大学生命科学学院

2.东北农业大学生命科学学院;山东省农业科学院奶牛研究中心

关键词： BRV;shRNA;NSP4基因

期刊名称： 病毒学报

ISSN： 1000-8721

年卷期： 2010 年 26 卷 03 期

页码： 86-90

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 本研究根据牛轮状病毒(Bovine rotavirus,BRV)的NSP4基因序列,设计并构建了shRNA重组慢病毒载体RNAi-H1-89,利用脂质体介导法,将RNAi-H1-89与辅助质粒共转染293细胞,包装shRNA重组慢病毒;重组慢病毒感染MA104细胞24h后继续接种BRV,以针对LacZ基因的shRNA重组慢病毒为对照,48h后与LacZshR-NA对照比较,RNAi-H1-89明显抑制MA104细胞病变;RT-PCR检测结果表明,针对NSP4基因的shRNA可特异性抑制牛轮状病毒NSP4基因表达;病毒滴度测定表明,在转染50%、75%、95%RNAi-H1-89质粒的细胞培养上清液中,病毒滴度分别是对照组的50%、20%和10%。上述实验结果表明,针对NSP4基因的shRNA能高效地沉默NSP4基因,并且能阻断牛轮状病毒增殖。