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转基因玉米MIR162转化事件特异性检测方法及其标准化

文献类型： 中文期刊

作者： 张广远 1 ; 孙红炜 1 ; 李凡 1 ; 杨淑珂 1 ; 路兴波 1 ; 赵蕾 2 ;

作者机构： 1.山东省农业科学院植物保护研究所

2.山东师范大学生命科学学院

关键词： 转化体特异性;MIR162;定性PCR;TaqMan探针实时荧光PCR;标准化

期刊名称： 作物学报

ISSN： 0496-3490

年卷期： 2013 年 39 卷 07 期

页码： 1141-1147

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 转基因玉米MIR162是美国先正达公司开发的新型抗鳞翅目昆虫的转基因玉米品种。本研究目的在于建立该品系转化事件特异性定性、定量检测方法并形成定性检测国家标准。定性PCR体系经实验室内部比对及实验室间循环验证结果表明,该体系特异性强,灵敏度较高(0.1%),具有良好的重复性和再现性。TaqMan探针实时荧光PCR检测结果表明,所设计的探针特异性强,检测低限(LOD)在0.01%以下;定量标准曲线R2均为0.999,扩增效率为98.622%和99.602%,SD范围为0.014～0.209,RSD的范围为0.049%～0.879%,稳定性好;对转基因含量为1.0%、0.5%、0.1%的样品定量结果相对偏差在8.0%以内,结果较为准确。本研究建立的方法完全可用于含转基因玉米MIR162成分样品的检测。

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