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番茄红素环化酶基因片段克隆及反义表达载体构建

文献类型: 中文期刊

作者: 李莉 1 ; 侯丽霞 2 ; 施木田 1 ; 吕鑫 3 ; 何启伟 2 ;

作者机构: 1.福建农林大学园艺学院

2.山东省农业科学院蔬菜研究所

3.吉林农业大学园艺学院

关键词: 番茄红素;β环化酶基因;ε环化酶基因;克隆;反义表达载体

期刊名称: 山东农业科学

ISSN: 1001-4942

年卷期: 2009 年 01 期

页码: 1-3+7

摘要: 根据已知的番茄红素环化酶基因,即β环化酶基因和ε环化酶基因的保守序列设计特异性引物。提取番茄叶片的RNA,经RT-PCR反应,扩增出723 bp和569 bp的目的片段,将它们分别连接到pEASY-T1 Cloning Vector上,测序鉴定其正确性。克隆到载体上的β环化酶基因用BamHⅠ和SmaⅠ双酶切,将基因反向插入PROK2表达载体上,构建PROK2-LYCb反义表达载体。同样连接到克隆载体上的ε环化酶基因用BamHⅠ和XbaⅠ双酶切,将基因反向插入PROK2表达载体上,构建PROK2-LYCe反义表达载体。

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