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口蹄疫病毒VP1基因重组慢病毒载体的构建及VP1基因稳定表达细胞系的建立

文献类型： 中文期刊

作者： 代文君 1 ; 王洪梅 1 ; 刘晓 1 ; 高运东 1 ; 于力 2 ; 王立群 3 ; 仲跻峰 1 ; 何洪彬 1 ;

作者机构： 1.山东省农业科学院奶牛研究中心

2.中国农业科学院哈尔滨兽医研究所

3.东北农业大学生命科学学院

关键词： 口蹄疫病毒;VP1;转染;稳定细胞系

期刊名称： 中国农业科学

ISSN： 0578-1752

年卷期： 2010 年 43 卷 16 期

页码： 3455-3460

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 【目的】构建口蹄疫病毒VP1基因重组慢病毒载体FG9-VP1,并建立稳定表达VP1基因的BHK-21细胞系。【方法】采用RT-PCR技术从口蹄疫病毒材料中扩增出VP1基因,并将其连入慢病毒载体FG9中,经PCR、酶切和测序鉴定正确后,转染BHK-21细胞,96h后经流式细胞分选筛选GFP阳性细胞,细胞增殖后经WB检测VP1基因的表达。【结果】VP1基因重组慢病毒载体FG9-VP1测序正确,转染BHK-21细胞经流式细胞仪筛选的GFP阳性细胞后可稳定表达VP1基因。【结论】VP1基因重组慢病毒载体构建成功并获得了稳定表达VP1基因的BHK-21细胞系。

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