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奶牛乳腺炎源性金黄色葡萄球菌山东分离株β-溶血素基因的克隆及原核表达

文献类型: 中文期刊

作者: 杨钦 1 ; 王长法 1 ; 杨宏军 1 ; 杨少华 1 ; 高运东 1 ; 仲跻峰 1 ; 彭广能 2 ;

作者机构: 1.山东省农业科学院

2.四川农业大学

关键词: 金黄色葡萄球菌;β-溶血素;克隆;表达

期刊名称: 中国兽医学报

ISSN: 1005-4545

年卷期: 2009 年 29 卷 05 期

页码: 572-575

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 以提取的奶牛乳腺炎源性金黄色葡萄球菌山东分离株(zfb)全基因组DNA为模板,PCR扩增β-溶血素基因(hlb),并与克隆载体pMD18-T相连接。测序结果表明,扩增片段含有993bp的ORF,可编码含330个氨基酸的成熟蛋白,与已报道的金黄色葡萄球菌β-溶血素蛋白的氨基酸同源性为99.4%。构建原核表达载体pET32a+/hlb,SDS-PAGE分析蛋白表达水平,IPTG诱导后表达的融合蛋白的相对分子量质为57000,表达量占菌体总蛋白的23.9%;表明原核表达质粒构建成功,并实现了有效表达。

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