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牛轮状病毒结构蛋白VP4基因的真核表达

文献类型： 中文期刊

作者： 王丹 1 ; 宋玲玲 2 ; 王洪梅 2 ; 杨宏军 2 ; 王立群 1 ; 何洪彬 1 ;

作者机构： 1.东北农业大学生命科学学院

2.山东省农业科学院奶牛研究中心

关键词： 牛轮状病毒;VP4;基因克隆;真核表达

期刊名称： 安徽农业科学

ISSN： 0517-6611

年卷期： 2012 年 40 卷 16 期

页码： 150-152

收录情况： 北大核心

摘要： [目的]克隆获得牛轮状病毒VP4全基因,并进行真核表达。[方法]采用RT-PCR技术,从牛轮状病毒总RNA中扩增出VP4基因,将其重组到含有Flag标签的pcDNA3.1(+)载体中,经PCR、酶切和测序鉴定正确后,通过Lipofect2000TM转染293T细胞,细胞增殖后经RT-PCR和Western Blot检测VP4基因的表达。[结果]获得了VP4基因的阳性重组真核表达载体pcDNA3.1(+)-VP4;转染293T细胞后经RT-PCR和Western Blot检测表明,该基因的重组表达载体构建正确,可在293T细胞内瞬时表达。[结论]VP4基因的重组真核表达载体构建成功并可在真核表达细胞内表达,该研究为VP4基因的DNA疫苗的研发及应用奠定了基础。

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