文献类型： 中文期刊

作者： 赵巧雅 ¹ ; 田野 ² ; 鞠艳 ² ; 姜亦飞 ² ; 黄涛 ³ ; 陈秋生 ¹ ;

作者机构： 1.南京农业大学动物医学院

2.山东省农业科学院家禽研究所

3.西南大学动物医学院

关键词： 兔轮状病毒;VP8*;蛋白特性;原核表达

期刊名称： 畜牧与兽医

ISSN：

年卷期： 2023 年 007 期

页码： 100-107

收录情况： 北大核心

摘要： 为深入研究兔轮状病毒VP8*蛋白的结构和功能，本研究利用生物信息学软件DNAStar对兔轮状病毒Z3171株的VP8*基因序列进行核苷酸和氨基酸同源性分析，运用生物信息学方法对该蛋白的理化性质、亲/疏水性、磷酸化及糖基化位点、结构域、中和表位及三维结构等进行了分析。设计合成引物，采用PCR方法扩增VP8*蛋白编码基因，并将目的片段克隆到pET28a（+）原核表达载体，经体外原核表达，采用亲和层析纯化获得VP8*目的蛋白。结果显示：Z3171株的VP8*基因与国内外参考序列对比，核苷酸序列同源性为32.8%～90.3%,氨基酸序列同源性为39.2%～91.9%。生物信息学分析显示该蛋白理化性质稳定，无跨膜结构域，不含有信号肽，主要定位于细胞骨架中。其中1个中和表位区域内有2个氨基酸插入，该区域三维构象亦发生变化。PCR扩增的VP8*基因条带大小为558 bp,经测序与目的基因完全一致；经SDS-PAGE和Western blot鉴定，重组VP8*蛋白以可溶形式表达，血凝性试验结果表明该蛋白无血凝性。本研究为VP8*免疫原性分析及研制兔轮状病毒疫苗提供了参考。