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转植酸酶基因(phyA2)玉米定性、定量PCR检测

文献类型： 中文期刊

作者： 于彩虹 1 ; 田少亭 1 ; 路兴波 2 ; 李凡 2 ; 杨淑珂 2 ; 孙红炜 2 ;

作者机构： 1.中国矿业大学(北京)化学与环境工程学院

2.山东省农业科学院植物保护研究所

关键词： 转植酸酶基因玉米;定性PCR;定量PCR;zSSIIb;植酸酶基因(phyA2)

期刊名称： 农业生物技术学报

ISSN： 1674-7968

年卷期： 2012 年 20 卷 04 期

页码： 356-361

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 转植酸酶基因玉米检测是对转植酸酶基因玉米释放进行有效监管的重要前提和技术支撑。本研究根据转植酸酶基因玉米(Zeamays)外源植酸酶基因phyA2序列设计基因特异性引物,进行了定性、定量PCR检测。定性结果显示,该引物可有效检测植酸酶玉米中phyA2基因,而在其他不含植酸酶基因的材料中则检测不到相应基因,表明该引物具有很高的特异性。以玉米内标准基因玉米淀粉合酶异构体zSTSII-2基因(zSSIIb)和植酸酶基因phyA2为对象,进行SYBRGreenⅠ染料法荧光定量PCR反应,绘制2种基因扩增循环数-拷贝数标准曲线图,根据混合样品中(zSSIIb)和植酸酶基因phyA2的拷贝数计算样品中的转基因含量,并做熔解曲线分析。结果表明,zSSIIb和phyA2标准曲线相关系数分别为0.998和0.995,相关性较好,两个基因的熔解曲线均呈单峰型,表明引物特异性较强,混合玉米样品(植酸酶玉米含量分别为1%、0.5%和0.1%)中植酸酶玉米含量分别为1.1%、0.54%和0.17%,实测值与理论值接近。本研究建立了转植酸酶基因玉米定性、定量PCR检测体系,可有效地对转植酸酶基因玉米进行检测。

  • 相关文献

[1]转植酸酶基因玉米phyA2基因标准质粒分子构建及其检测应用. 张广远,孙红炜,李凡,杨淑珂,路兴波,赵蕾. 2013

[2]转植酸酶基因(PhyA2)玉米的种植及秸秆还田对土壤氮磷钾含量的影响. 赵康,杨正友,孙红炜,李凡,杨淑珂,路兴波. 2014

[3]转植酸酶基因玉米对田间节肢动物群落多样性的影响. 李凡,孙红炜,杨淑珂,赵维,徐晓辉,高瑞,路兴波. 2014

[4]转植酸酶基因玉米对田间主要害虫和天敌种群动态的影响. 李凡,孙红炜,杨淑珂,赵维,郭颖慧,路兴波. 2013

[5]转基因番茄定性PCR检测. 李宁,孙红炜,赵蕾,李凡,杨淑珂,路兴波. 2011

[6]转基因玉米MIR162转化事件特异性检测方法及其标准化. 张广远,孙红炜,李凡,杨淑珂,路兴波,赵蕾. 2013

[7]转基因玉米外源基因通过花粉漂移的频率和距离. 路兴波,孙红炜,杨崇良,刘开启,尚佑芬,赵玖华. 2005

[8]转基因玉米的定性PCR检测. 袁磊,赵蕾,孙红炜,颜世磊,路兴波. 2009

[9]转基因玉米MON88017旁侧序列分析及定性PCR检测. 袁磊,孙红炜,杨崇良,尚佑芬,路兴波,赵蕾. 2010

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