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转基因大豆BPS-CV127-9 PCR定量检测研究

文献类型： 中文期刊

作者： 李宁 1 ; 赵蕾 2 ; 孙红炜 1 ; 李凡 1 ; 杨淑珂 1 ; 路兴波 1 ;

作者机构： 1.山东省农业科学院植物保护研究所

2.山东师范大学生命科学学院

关键词： 品系特异性;实时荧光定量PCR;转基因大豆

期刊名称： 大豆科学

ISSN： 1000-9841

年卷期： 2012 年 31 卷 005 期

页码： 808-812

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 采用SYBR Green实时荧光定量PCR技术,建立转基因大豆BPS-CV127-9的定量检测方法.通过设计特异引物,扩增内标准基因lectin和BPS-CV127-9的5'侧翼序列,建立2种基因的拷贝数-CT标准曲线,根据标准曲线方程计算样品中的转基因含量,并且通过熔解曲线分析扩增反应特异性.结果表明,lectin基因和侧翼序列标准曲线线性关系良好,R2值分别为0.999和0.998,变异系数(CV) 1.50%~18.51%、标准偏差(SD)0.02 ~0.07.检测4个已知BPS-CV127-9含量(1%、0.5%、0.1%、0.05%)的转基因混合样品,实测值与实际值接近.该检测方法具有快速、灵敏、准确、特异、高通量等优点,可以作为转基因大豆BPS-CV127-9的定量检测方法.

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