文献类型： 中文期刊
作者： 吴斌 1 ; 姜珊珊 1 ; 张眉 1 ; 徐德坤 1 ; 辛志梅 1 ; 王升吉 1 ;
作者机构： 1.山东省农业科学院植物保护研究所;临沂市植物保护站
关键词： 人工ta-siRNA;马铃薯Y病毒(PVY);RNA介导的病毒抗性;转基因烟草
期刊名称： 山东农业科学
ISSN： 1001-4942
年卷期： 2018 年 12 期
页码： 86-90
摘要： 人工ta-siRNA基因沉默技术具有同时表达多个ta-siRNA和产生ta-siRNA位置固定等特点,在精确性和高效性等方面有明显优势。本研究以马铃薯Y病毒(potato virus Y,PVY)外壳蛋白(coat protein,CP)为靶基因,选取不同位置的3个siRNA为靶序列,烟草TAS3a作为ta-siRNA表达的骨架,分别构建植物表达载体PVY-CP5'、PVY-CPM和PVY-CP3',并利用叶盘法转化烟草NC89。瞬时表达检测结果显示,3个syn-tasiRNA植物表达载体均能在植物体内成功表达siRNA;抗病性鉴定发现,转PVY-CP5'、PVY-CPM和PVY-CP3'的转基因株系中抗病株系的比率分别为45. 08%、27. 21%、61. 90%;Northern杂交分析显示,目的片段转录产物(总RNA)的积累量与植株的抗病性呈负相关,转基因植株中均有siRNA存在,表明植株的病毒抗性是由RNA介导的。
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