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虾青素合成关键酶基因bkt和CrtR-B双价植物表达载体的构建及对花生的遗传转化

文献类型: 中文期刊

作者: 徐静 1 ; 杨庆利 2 ; 檀琮萍 3 ; 侯艳华 3 ; 禹山林 2 ; 秦松 3 ;

作者机构: 1.淮海工学院江苏省海洋生物技术重点建设实验室

2.山东省花生研究所

3.中国科学院海洋研究所

关键词: 虾青素;bkt基因;CrtR-B基因;载体构建;花生

期刊名称: 河南农业科学

ISSN: 1004-3268

年卷期: 2007 年 36 卷 12 期

页码: 37-41

收录情况: 北大核心

摘要: 虾青素是一种具有极强抗氧化活性的类胡萝卜素,具有广泛的应用价值。β-胡萝卜素酮化酶(BKT)和β-胡萝卜素羟化酶(CrtR-B)是虾青素的生物合成途径中的两个关键酶。采用LaTaqDNA聚合酶用PCR的方法分别从pET-28a(+)-bkt,pET-28a(+)-CrtR中扩增得到bkt和CrtR-B基因,用bkt基因替换pBI221中的GUS基因形成含有CaMV 35S启动子和NOS终止子的bkt基因表达盒,然后插入植物表达载体pCAMBIA1301的多克隆位点,再用CrtR-B基因替换pCAMBIA1301中的另一个GUS基因,形成CrtR-B基因表达盒,最终获得带有抗性基因的双价植物表达载体pCAMBIA1301-bkt-CrtR。通过农杆菌EHA105介导将其转入花生(花育23),获得了经卡那霉素筛选的抗性植株,通过PCR扩增验证,花生基因组中含有这两个基因。

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