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转植酸酶基因玉米phyA2基因标准质粒分子构建及其检测应用

文献类型: 中文期刊

作者: 张广远 1 ; 孙红炜 1 ; 李凡 1 ; 杨淑珂 1 ; 路兴波 1 ; 赵蕾 2 ;

作者机构: 1.山东省农业科学院植物保护研究所/山东省植物病毒学重点实验室

2.山东师范大学生命科学学院

关键词: 转植酸酶基因玉米;质粒分子;TaqMan探针

期刊名称: 作物学报

ISSN: 0496-3490

年卷期: 2013 年 39 卷 08 期

页码: 1501-1506

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 质粒分子以其良好的适应性被较多地用作转基因标准材料的替代品。本文根据转植酸酶基因玉米phyA2基因设计引物与探针,并构建了一种包含phyA2基因片段(243 bp)和内标基因片段(178 bp)的质粒分子pPZ。选取不同转基因模板DNA作用于phyA2特异性引物,PCR结果显示只有转植酸酶基因玉米出现131 bp的目的条带;选取不同转基因作物检测体系作用于质粒分子pPZ,只有以pPZ DNA为模板时出现目的条带(131 bp和88 bp)。同时采用pPZ质粒分子和转基因玉米阳性基因组DNA为标准对4个转植酸酶基因玉米混合样品(3.0%、1.0%、0.5%和0.1%)进行定量检测,t检验表明,2种标准产生的斜率、线性相关系数和定值结果没有显著差异。这些结果表明,pPZ质粒分子可以作为转植酸酶基因玉米替代品用于定性和定量检测。

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