文献类型: 中文期刊
作者: 王向柳 1 ; 王长法 1 ; 杨宏军 1 ; 阿合买提·买买提 2 ; 高运东 1 ; 仲跻峰 1 ;
作者机构: 1.山东省农业科学院奶牛研究中心
2.新疆农业大学动物医学学院
关键词: 无乳链球菌;CAMP因子;克隆;表达
期刊名称: 新疆农业科学
ISSN: 1001-4330
年卷期: 2009 年 46 卷 01 期
页码: 54-58
收录情况: 北大核心 ; CSCD
摘要: 提取能产生CAMP反应的牛源无乳链球菌山东分离株的基因组DNA,PCR扩增CAMP因子基因,重组到pMD18-T载体中。测序结果表明,扩增片断含有768 bp的ORF,可编码含255个氨基酸的成熟蛋白,与已报道的无乳链球菌CAMP因子蛋白的氨基酸组成相比,第8位Tyr→Cys,第95位Pro→Ser,第126位Thr→Ala的3个氨基酸发生了点突变,同源性为98.4%。成功构建原核表达载体pET32a+/cfb,SDS-PAGE分析蛋白质表达水平,IPTG诱导后表达的融合蛋白分子量为48 kD,表达量占菌体总蛋白的52.7%。这为进一步研究其致病与免疫机理、疫苗设计提供了条件。
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