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牛流行热病毒SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法的建立及应用

文献类型: 中文期刊

作者: 楚会萌 1 ; 任亚初 1 ; 程凯慧 1 ; 解晓莉 1 ; 张亮 1 ; 孙阳阳 1 ; 杨宏军 1 ;

作者机构: 1.山东省农业科学院奶牛研究中心

关键词: 牛流行热病毒;荧光定量PCR;G基因;检测

期刊名称: 中国兽医科学

ISSN: 1673-4696

年卷期: 2019 年 010 期

页码: 1256-1260

收录情况: 北大核心 ; CSCD

摘要: 为建立牛流行热病毒(BEFV)的荧光定量PCR检测方法,本研究根据GenBank中已登录的BEFV的G基因保守序列设计了1对特异性引物.结果显示,建立的标准曲线线性关系较好,其相关系数为0.996 3.该方法仅对BEFV检测为阳性,表明其特异性强.该方法的检测下限约为4.0*10~1 copies/μL,比普通PCR敏感性高10倍.重复性试验结果显示,该方法的组内和组间变异系数均小于0.76%.利用本方法分别对45份牛病料样品进行检测,结果检出了11份阳性样品,表明所建立的荧光定量PCR方法准确可靠,可以用于BEFV的快速诊断和定量分析.

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