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羊白细胞介素-18成熟蛋白的酵母表达和生物学活性研究

文献类型： 中文期刊

作者： 刘文强 1 ; 刘桂芹 1 ; 路建彪 1 ; 赵宏坤 2 ; 许传田 3 ;

作者机构： 1.聊城大学农学院

2.山东农业大学动物科技学院

3.山东省农科院畜牧所

关键词： 山羊;白细胞介素-18;酵母表达系统;活性

期刊名称： 中国预防兽医学报

ISSN： 1008-0589

年卷期： 2009 年 31 卷 12 期

页码： 969-973

收录情况： 北大核心 ; CSCD

摘要： 为了研究重组羊白细胞介素(gIL)-18在酵母系统中的高效表达,进一步阐明该重组蛋白的生物学活性,以含有gIL-18基因的重组质粒为模板进行PCR扩增,构建重组表达质粒pPICZ-gIL-18,转化于毕赤酵母GS115,以甲醇诱导表达,经SDS-PAGE和western blot分析证实了重组蛋白的表达,分泌的重组gIL-18表达量为100mg/L。经纯化后用MTT法和MDBK-VSV法检测表达的重组IL-18体外生物活性,利用免疫试验检测了重组蛋白对羊痘疫苗的免疫增强作用。实验结果表明,该蛋白具有诱导MDBK细胞分泌IFN-γ和刺激PBMC增殖的生物学活性,比活性为1.5×105u/mg。体外具有增强羊痘疫苗的活性。毕赤酵母分泌表达的重组gIL-18具有良好的生物学活性,为gIL-18作为免疫佐剂和免疫治疗剂的大规模应用奠定了基础。

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