科研产出
利用嫁接提高花生离体再生或转基因苗成活率的研究
《中国农学通报 》 2009 北大核心
摘要：【研究目的】花生(Arachis hypogaea L.)是世界上重要的油料作物。近年来,花生分子生物学发展迅速,但低效的再生和遗传转化系统严重制约着利用基因工程改良花生品种的研究,该研究旨在利用嫁接的方法提高花生再生和转化苗的成活率,缩短再生周期。【研究方法】分别采用劈接、斜接、插接的方法将再生和转化的花生苗嫁接到实生花生砧木上。【研究结果】利用嫁接技术将组培苗或转基因苗嫁接到实生苗砧木上,不同嫁接方法成活率达到70%～100%,远远高于转基因幼苗直接诱导生根移栽的成活率。【主要结论】实验证明,嫁接可提高花生再生和转化苗的成活率,可广泛应用于花生基因工程育种研究中。
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黑籽南瓜离体再生体系与转基因技术研究
《山东农业科学 》 2009
摘要：以黑籽南瓜为试验材料,子叶为外植体,建立了黑籽南瓜组织培养再生体系,并对转基因常用的抗生素浓度进行了筛选。试验结果表明:萌发4天的子叶是诱导芽再生的最佳外植体,MS+1.0 mg/L BA是诱导芽再生的最适培养基,1/2MS+0.5 mg/L GA3是适合再生苗壮苗和生根的培养基。100 mg/L卡那霉素、50 mg/L潮霉素适于南瓜的转基因,初步的转基因研究验证了此转化体系的有效性。
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梨韧皮部特异表达启动子AtSUC2驱动下的GUS基因的转化和表达
《园艺学报 》 2008 北大核心 CSCD
摘要：以‘Old Home’梨无菌苗叶片为外植体,利用根癌农杆菌介导将专一在韧皮部表达启动子AtSUC2驱动下的GUS基因转入‘Old Home’中。筛选出了‘Old Home’梨叶片高效遗传转化的最佳条件:农杆菌和外植体在液体培养基上共培比在固体培养基上共培转化率提高5倍。PCR分析和Southern杂交鉴定表明GUS基因已整合到转基因植株的基因组中,组织化学检测和Western杂交鉴定证明了GUS基因在转基因植株韧皮部中的表达。
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农杆菌介导轮状病毒抗原蛋白VP4基因遗传转化花生的研究
《作物学报 》 2008 北大核心 CSCD
摘要：选用鲁花14与花育23花生品种,通过农杆菌介导开展了轮状病毒抗原蛋白VP4基因遗传转化研究,从转化植株中随机选取26株表现Kan抗性植株进行nptII基因的PCR检测,结果有22株能扩增出620bp左右的nptII基因条带,阳性率约为84.62%。提取nptII基因显示为阳性的植株叶片DNA作模板,用VP4基因特异引物进行PCR扩增,经琼脂糖凝胶电泳分析,所有nptII基因阳性的植株均扩增出了约2350bp的特异性条带,而野生型没有。对部分转基因植株进一步进行PCR-Southern杂交和Southern杂交分析,发现转基因植株中出现了阳性杂交信号,表明VP4基因的确已经整合到花生的基因组中,并且是1~2个拷贝。用RT-PCR分析了11株转G1VP4基因的植株,证明插入鲁花14中的VP4基因已经正常转录,利用Westernblot方法检测筛选到的4株转基因花生,分别提取其蛋白,在30kD处出现特异性蛋白条带,这为获得转基因创新种质材料奠定了基础。
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基因枪法获得玉米转基因植株的研究
《玉米科学 》 2008 北大核心 CSCD
摘要：采用基因枪轰击转化技术将含有抗除草剂chlorsulfuron基因AHAS的PCD220质粒导入玉米愈伤组织,并再生出具有抗该除草剂的转基因植株,同时研究了影响玉米基因枪转化效率的因素。基因枪轰击时,金粉用量、轰击次数及轰击距离对愈伤组织的转化率有较大影响。转化时,以金粉用量100μg/枪、轰击2次、发射点与靶细胞的距离9cm最合适。对所获得的转化植株进行PCR分析及Southern杂交鉴定,部分转化植株呈PCR阳性和明显的杂交信号,说明抗除草剂绿黄隆的基因AHAS已整合到玉米基因组当中,将转基因植株进行自交,获得了T0代的种子。
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植物轮状病毒疫苗研究进展
《安徽农业科学 》 2008 北大核心 CSCD
摘要：简要分析了植物疫苗应用和研究现状,阐述了轮状病毒疫苗研究进展,包括轮状病毒的危害、轮状病毒疫苗研发过程,以及生物技术在轮状病毒研究中的应用等,可为轮状病毒疫苗的深入开发提供理论依据。
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甜瓜组织培养及遗传转化研究进展
《中国瓜菜 》 2007
摘要：概述了甜瓜组织培养过程中外植体类型、培养基组成、添加物等主要因素对植株再生的影响,以及甜瓜体细胞胚状体发生途径、单倍体、原生质体培养的研究现状和根癌农杆菌介导甜瓜遗传转化的研究进展。
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