科研产出
樱桃矮化砧木‘吉塞拉6号’基因转化体系的建立
《园艺学报 》 2008 北大核心 CSCD
摘要：采用‘吉塞拉6号’甜樱桃矮化砧木(Prunus cerasus×P.canescens)离体叶片外植体,在再生培养基附加生长素的条件下通过根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)EHA105(p35SGUS intron)介导研究了β-葡萄糖醛酸酶基因(GUS)的瞬时表达、稳定表达和转基因植株再生,证明了培养基中生长素(IBA或NAA)的存在可促进基因转化,转化效率比对照提高2倍以上。将500个叶片外植体与EHA105(p35SGUS intron)株系在含有生长素的培养基中共培养,获得了11个转基因株系。采用PCR分析和South-ern Blotting核酸杂交,确定GUS基因已整合到矮化砧木‘吉塞拉6号’植株的染色体上。组织化学染色确定了GUS基因在植株体内的表达。
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提高苹果基因转化效率的研究
《果树科学 》 2000 北大核心 CSCD
摘要：采用根瘤农杆菌（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｍｅｆａｃｉｅｎｓ）强株系ＥＨＡ１０５（ｐ３５ｓＧＵＳ－ｉｎｔｒｏｎ）研究了影响‘皇家嘎拉’苹果（Ｍａｉｎｓ ｄｏｍｅｓｔｉｃａ Ｂｏｒｋｈ．）外植体的β-葡萄糖醛酸酶（ＧＵＳ）基因的瞬时、稳定表达水平和转基因植株的再生。证明在培养基生长素（ＩＢＡ、ＮＡＡ）存在的条件下，外植体的ＧＵＳ基因的瞬时表达水平提高了３－４倍，而共培养两周后稳定表达水平提高２倍以上，产生９．８个ＧＵＳ愈伤组织表达区域。白化处理促进外植体的基因转化，白化处理的新梢顶端第一节间外植体ＧＵＳ表达区域比常用的叶片外植体高４倍。在生长素存在的条件下 ２％外植体获得了转基因植株。Ｓｏｕｔｈｅｒｎ ＢｌｏｔＤＮＡ杂交和组织化学染色分析证明ＧＵＳ基因已整合到苹果的染色体上，并得以表达。
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培育苹果转基因植株的研究
《落叶果树 》 2000
摘要：采用“皇家嘎拉”苹果（ Ｍａｌｕｓ ｄｏｍｅｓｔｉｃａ Ｂｏｒｋｈ） 白化茎段外植体，通过根癌农杆菌（ Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕ ｍｔｕ ｍｅｆａｃｉｅｎｓ）ＥＨＡ１０５（ｐ３５ＳＧＵＳｉｎｔ） 介导，证明了培养基中存在生长素可促进基因转化，转化效率比对照提高２倍以上。将外植体与ＥＨＡ１０１（ｐ３５ＳＧＵＳ） 株系在含有生长素的培养基中共培养，获得了转基因植株。采用ＰＣＲ 分析和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ Ｂｌｏｔ 核酸杂交，确定ＧＵＳ 基因已整合到苹果植株的染色体上。组织化学染色确定了ＧＵＳ 基因在植株体内的表达。
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双抗TMV+CMV辣椒转基因工程植株的再生及抗病毒鉴定
《华北农学报 》 1999 北大核心 CSCD
摘要：在构建 Ｔ Ｍ Ｖｃｐ 和 Ｃ Ｍ Ｖｃｐ 双价表 达载体和 建立 辣 椒高 效转 化 体系 的基 础 上用 农杆 菌 介导法转化 辣椒栽培 品种农 大４０ 和湘 研一号。 对５２ 个抗 卡那霉 素再生植 株进行点 杂交 鉴定 ，结果 １６株为 Ｔ Ｍ Ｖｃｐ 和 Ｃ Ｍ Ｖｃｐ 阳 性，而 Ｐ Ｃ Ｒ 检测发 现 其中 有 ２ 株 为假 阳性 株。 进一 步 温室 攻毒 试 验 表明有７ 个 阳性转基 因植株 对 Ｔ Ｍ Ｖ 和 Ｃ Ｍ Ｖ 同时表 现为免疫 。
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