羊栖菜多糖抗A型塞内卡病毒感染PK-15细胞活性和机制探究

张诗悦; 张亮; 张伟; 陈九; 杨少华; 高星熠; 闫滨; 李宝国; 杨宏军; 《山东农业科学 》 2024

摘要：研究羊栖菜多糖抗A型塞内卡病毒（Senecavirus A,SVA）感染PK-15细胞的活性及机制。首先采用水提法提取羊栖菜粗多糖，然后用不同孔径超滤膜将粗多糖分为不同分子量段；通过荧光定量PCR测定不同分子量粗多糖抗SVA活性，采用水提醇沉法将抗SVA活性最高分子量段的粗多糖进行纯化并测定其细胞毒性及抗SVA活性；通过在SVA感染周期不同阶段给药研究纯化多糖的抗SVA机制。结果表明，分子量越大的粗多糖抗SVA活性越强；多糖浓度和SVA浓度均与抗SVA活性呈现量效关系，纯化后的多糖对SVA（MOI=0.1）感染PK-15细胞的治疗指数为412,1 mg/mL的多糖对SVA(MOI=10^-1～10~4)感染PK-15细胞病毒载量的抑制率在90%～99.999%之间；不同给药时间试验结果表明，多糖能在SVA吸附或穿入细胞以及病毒复制过程发挥抗病毒作用，其中抑制SVA吸附或穿入的活性最强。本研究分离纯化得到的羊栖菜多糖有很强的抗SVA活性，可为后续抗SVA药物的研发提供参考。

关键词： 羊栖菜多糖 A型塞内卡病毒 提取 纯化 抗病毒